异辛醇中酶法合成阿莫西林的工艺研究

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阿莫西林具有高效的广谱抗菌作用而且副作用很小,世界卫生组织(WHO)推荐本品作为首选的β-内酰胺类口服抗生素。工业上生产阿莫西林通常用化学方法,步骤烦琐,条件苛刻,而且污染严重。随着环境保护日益重要,酶促合成β-内酰胺抗生素已经变得越来越受人关注。通过筛选确定异辛醇为反应介质,系统研究了反应体系中的水含量,反应温度,反应时间,酶的浓度,底物的浓度以及底物的摩尔浓度比对阿莫西林合成的影响。温度为15℃,水含量为7.5%,6-APA浓度为100 mM,HPGM浓度为250 mM,IPA浓度为15 U/mL,阿莫西林合成反应达到94.5%的高产率只需要11 h,比叔戊醇作为反应介质时达到88%的最高产率所用的反应时间(20 h)缩短了将近50%。固定化酶可循环使用10次而未见有明显的活性减少。通过将不同类型的表面活性剂和糖作为添加物加入阿莫西林合成体系中考察阿莫西林的合成,结果发现十二烷基苯磺酸钠和海藻糖对阿莫西林合成的影响最为明显。发现反应温度为15℃,HPGM.和6-APA的摩尔浓度分别为100 mM和150 mM时,海藻糖浓度对阿莫西林产率的影响最为显著。当加入海藻糖的浓度为0.13 mol/L时,阿莫西林的产率从57%增加到82.6%。以海藻酸钠-聚乙烯醇(1750)为载体,以氯化钙、硼酸为交联剂,采用包埋法制备固定化青霉素G酰化酶。实验发现,当聚乙烯醇(1750)浓度为1%时,海藻酸钠的浓度为4%,氯化钙溶液的浓度为4%,加入5 mL酶溶液,在4℃冰箱中固定化1 h可以得到56 U/g的最大酶活。
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