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目的：抑癌基因p53 通过控制细胞增殖，诱导细胞凋亡来维持细胞遗传物质的稳定性，其功能失活与否成为影响肿瘤发生、发展及治疗疗效的关键因素。约有50%的恶性肿瘤存在该基因功能失活，故而该基因与恶性肿瘤的发生、发展的关系以及在肿瘤治疗中的前景受到普遍的关注。目前已经有一些围绕p53分子进行诸如头颈部鳞癌、非小细胞肺癌等实体肿瘤治疗的临床实验，并取得一定疗效。据流行病学调查发现，白血病中也存在不同程度的p53基因突变或功能失活，并且与疾病进展和预后明显有关。目前研究发现，在淋巴细胞来源的恶性肿瘤细胞Jurkat（p53蛋白－）中引入野生型p53基因可以诱导凋亡，但在髓性白血病来源的肿瘤细胞K562（p53蛋白－）引入p53能否诱导凋亡却颇有争议。本研究拟转移野生型p53基因到K562细胞，观察恢复该细胞的p53蛋白功能后该细胞的生物学行为的改变以及加入化疗药物vp-16-213后细胞的变化，以期探索用野生型p53基因治疗白血病的可能性。方法：以有限稀释法筛选单克隆K562细胞，电穿孔法转染野生型p53基因，RT-PCR和免疫细胞化学方法检测p53的mRNA和蛋白的表达情况，确认转染成功后，以3H-TdR掺入法测定各实验组细胞的增殖情况，用流式细胞仪分别以TUNEL、Annexin-V、细胞周期检测细胞的凋亡情况和细胞周期分布情况，并检测加入 vp-16-213后细胞的凋亡情况。<WP=8>结果： 1、该重组质粒在K562细胞中6小时即开始表达p53mRNA和p53蛋白质，可持续表达72小时以上，并有过表达现象。2、3H-TdR掺入法显示p53-K562在1×105/ml接种48小时和5×104/ml 接种72小时发生明显的增殖抑制，平均抑制率为24.17%。3、p53-K562组24小时和48小时G1期细胞比例分别为48.76±3.43%和50.34±3.56%，野生型K562组分别为42.59±3.38%和45.40±1.00%，相比有显著性差异（P<0.05）。4、p53-K562组和K562组、neo-K562组用TUNEL、Annexin V和亚二倍体峰检测未发现有凋亡细胞比例差异。5、vp-16-213（1μg/ml）作用6小时和24小时后，p53-K562组和K562组、neo-K562组经Annexin V检测未发现有凋亡细胞比例改变。结论：1）p53-pREP9在K562细胞中成功转染和表达p53蛋白。 2）p53蛋白可以抑制K562细胞的增殖。 3）p53蛋白可以导致K562细胞出现G1期停滞。 4）未发现p53蛋白诱导K562细胞凋亡。 5）在1μg/ml剂量的vp-16-213作用下，未发现与p53蛋白有协同诱导K562细胞凋亡的作用。