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为进一步探索滞育卵随时孵化的技术，解明用盐酸浸渍打破蚕卵滞育的机理，试验采取H202、盐酸、高温、低温相互协作处理的办法，从解除滞育的技术上研究了滞育卵的孵化。利用SDS-PAGE电泳、双向电泳、质谱技术对滞育卵与非滞育卵、经浸酸与非浸酸处理的蚕卵蛋白进行电泳分析，探索查找与滞育解除相关联的蛋白，对浸酸解除滞育的机理进行分析，获得了如下的主要结果。
1．用6％的H202在47~C浸渍产卵后24h～48h的“南丰”、“5A研”、“7·湘x9芙”的蚕种30min，可在一定程度上阻止蚕卵进入滞育，品种“南丰”在产卵后24h处理达到最高的孵化率72．82％；品种"5A研”在产卵后42h处理达到最高的孵化率97．33％；品种“7·湘x9．芙”在产卵后24h处理达到最高的孵化率为52．55％。表明H202对不同品种的活化作用存在差异。对经H202处理而不能孵化的蚕卵，在室温保存32天后，再经盐酸浸渍处理，品种“7．湘x9．芙”最高孵化率达到94．29％，“南丰”最高孵化率达到91．26％，“5A研”最高的孵化率达到39．43％。表明盐酸和H202有协同解除滞育卵孵化的作用，其合适的处理方法有待进一步摸索。
2．产后经过20～32日龄的“7·湘x9．芙”滞育卵，通过高温预处理再行浸酸，实用孵化率达到66．41～85．69％，最高孵化率达到89．66％。对产后经过20～32日龄的滞育卵经5~C条件下冷藏8天，然后通过37~C高温预处理再行浸酸，蚕种的实用孵化率达到68．49～83．32％，最高孵化率达到92．31％。表明滞育程度较深的蚕卵通过一定条件浸酸处理可以达到较好的孵化。
3．通过温度调控让“芙五”产下滞育卵与非滞育卵，分别提取蚕卵的易溶蛋白和难溶蛋白，进行SDS-PAGE电泳的图谱比较分析，在易溶蛋白中，非滞育卵比滞育卵多出分子量为52．887kD和42．603kD的蛋白组分。在难溶蛋白中，非滞育卵产后第5天比滞育卵多出分子量为88．298kD和42．470kD的蛋白组分。推测这些蛋白是与胚胎发育有密切关联的蛋白。
4．“7·湘x9芙”产后48h用6％的H202处理，在室温经过32天后仍未见孵化，再作浸酸处理，提取浸酸前后难溶的卵蛋白作Tricine-SDS-PAGE电泳分析，发现浸酸前估测分子量为13．586kD的蛋白组分，经过浸酸后消失。同时在经45天冷藏的“7·湘x9-芙”滞育卵中，也发现浸酸前估测分子量为15．325kD的蛋白组分，经过浸酸后消失。此外，浸酸前后的蚕卵蛋白，有多个组分在含量上发生了3倍以上的变化，表明浸酸引起蚕卵蛋白的表达变化，参与了滞育的解除，其功能值得今后深入研究。
5．试验对“7湘×9芙”滞育卵在冷藏45天后出库，提取浸酸与非浸酸的同日龄期的蚕卵易溶蛋白进行SDS-PAGE电泳，未经浸酸的蚕卵蛋白泳带从出库后的第一天到第8天的蛋白泳带均变化不大，而与之相对应的浸酸卵的蛋白泳带，在浸酸第6天之后，蛋白组分有较明显的变化。经ImageMasterTM2DPlatinum5．0软件进行蛋白带的检测和分子量估计分析，浸酸后第7天的卵蛋白与未浸酸的卵蛋白相比，多出分子量不同的n个蛋白组分，而减少了3个分子量不同的蛋白组分。
6．对“芙五”产后第4天的滞育卵与非滞育卵的易溶蛋白，进行双向电泳，通过ImageMasterTM2DPlatinum5．0软件分析电泳图谱中蛋白质点，发现滞育卵与非滞育卵存在着不同的特异蛋白，非滞育卵蛋白特异斑点有17个，滞育卵蛋白特异斑点有15个。特异蛋白斑点的等电点多集中在4～8的范围。即使部分同种蛋白在滞育卵和非滞育卵中也存在含量上的差异。
7．对冷藏45天的“7·湘x9．芙”蚕卵，提取浸酸前后易溶蛋白，用pH4～7窄范围胶条作双向电泳分析时，检测浸酸前后的蛋白点个数分别为523个和526个，能匹配的蛋白点有482对，匹配率达到91．897％，其中浸酸前后蚕卵易溶总蛋白图谱中存在特异蛋白点分别有41个和44个。在难溶蛋白部分，浸酸前后检测到的蛋白点分别为281个和304个，其中匹配蛋白点数为240个，匹配率达到82．05％。浸酸前特异蛋白点有41个，浸酸后特异蛋白点有64个。
8．将“7·湘x9．芙”滞育卵在浸酸前存在，浸酸处理后消失的2个凝胶差异蛋白点用电喷雾串联质谱(ESI-MS-MS)进行了鉴定分析，蛋白点№．1经串联质谱得到的两个肽段序列：R．GFSGGGLPVATASAAPTGLGIASENR；R．GYGGLGYGGLGYGGLGYGGLGGGCGR．G。蛋白分子量(MW)为13523．93Da；等电点(pI)为6．28。经搜索NCBI上Bombyx．fasta的冗余蛋白库匹配比对，认为是浆膜蛋白(chorionprotein[Bombyxmori])。蛋白点№．2经串联质谱图得到的一个肽段序列为：R．LSSDGVLSVIAPR．K。蛋白分子量(MW)为19890．56Da：等电点(pi)为6．53。经搜索NCBI上Bombyx．fasta的冗余蛋白库匹配比对，与热激蛋白(heatshockproteinhsp19．9[Bombyxmorip有15个氨基酸匹配。推测可能是一种热激蛋白。这两个浸酸前存在而浸酸后消失蛋白，推测是参与发动滞育解除有功能作用的蛋白，这一发现有待更深入的研究。