肝脏疾病是对人类健康造成威胁和死亡的重要疾病之一。目前,从天然产物中获得的保肝药物仍是治疗这类疾病的有效手段。肝脏疾病主要是由有毒化学物质、过量饮酒、感染和自身免疫性疾病引起的。这些肝毒性物质大多通过诱导脂质过氧化和过度氧化应激来破坏肝细胞。因此,具有抗氧化和抗炎活性的化合物是预P防和治疗药物性肝损伤(DILI)的有效药物。然而,目前已有的抗肝毒性药物疗效低、不良反应严重、使用成本高,难以满足患者的治疗需求。因此,我们迫切需要研究其它保肝药物,以改善这种供不应求的状况,挽救更多的生命。从天然产物中分离出的保肝化合物由于水溶性差、酶P降解等原因,导致口服生物利用度低、治疗效果受差。因此,开发一种增加难溶性药物溶解度和生物利用度的纳米制剂,是解决问题行之有效的方法之一。在此,本研究所用的模型化合物,即大分子三酰甘油结合的辛酸(TPA)和小分子异丙醛(CuA),分别从具有显著药理活性的石榴油和异丙苯油中获得,如抗癌、抗炎和抗糖尿病。然而,体内对TPA和CuA的吸收不足,以及由于快速代谢、化学不稳定性和高亲脂性导致的口服生物利用度低,对其广泛的临床应用产生了不利影响。因此,开发新型药物输送系统以增强这些油的生物活性可能是朝着正确的方向迈出的一步。因此,本研究开发了TPA和CuA纳米制剂,以提高生物利用度和增强抗肝毒性活性。本论文共分四章,共分三个方面,具体如下:主要内容如下:第一章 天然保肝化合物及其递药系统本章对天然保肝化合物即三酰甘油-石榴酸(TPA)和枯茗醛酸(CuA)及其适宜的释药系统进行了综合叙述,并重点阐释了TPA和CuA的抗氧化和抗炎活性治疗药物性肝损伤(DILI)的潜能,综述了TPA和CuA的研究现状,包括其来源、提取工艺、药物动力学、保肝效果以及面临的问题和展望。此外,本章还对提高TPA和CuA生物利用度的药物传递系统进行了探讨,为本文的研究工作奠定坚实基础。第二章 三酰基甘油-石榴酸脂质纳米制剂的制备、优化和表征本章分别采用响应面设计(BBD)、星点设计(CCD)和反应曲面法(RSM)优化载TPA的囊泡(TPA-NS)和纳米脂质体(TPA-NL)的制备工艺。通过RSM-BBD和二次模型对TPA-NS的进行了优化,得到最佳质量比为span 80(70 mg)、胆固醇(19.99 mg)相TPA(6.48 mg)。同样,将观察到的数据拟合到二次多项式万桂后,利用RSM-CCD对TPA-NL进行优化,得最佳工艺为磷脂:胆固醇(W/W)为6:1,以TPA质量(7mg)为最优独立指标。通过优化工艺制备的TPA-NS制剂呈离散球形,平均粒径较大(491.90±46.30 nm),多分散性指数合理(PDI,0.324±0.05),zeta电位为-38.58±0.21 mV,包封率提高(EE,87.48±4.79%)。最佳工艺制备的TPA-NL为球形,均匀分布,平均粒径较小(123.54±1.92nm),PDI较窄(0.21±0.046),zeta电位为-39.09±0.66mV,包封率较高(85.77±1.05%)。两种制剂的红外光谱表征表明,TPA成功包埋在囊泡和纳米脂质体小泡中。此外,TPA-NS和TPA-NL在1个月的贮藏期内相对稳定,且与游离TPA相比,TPA-NS和TPA-NL体外溶出显著。此外,TPA-NS在溶解介质中遵循威布尔函数,并结合反常扩散和菲克扩散释放机制。本章结果初步表明,传统的囊泡脂质体可以包载大分子TPA,提高体外释放。第三章 枯茗醛脂质纳米载体的配方优化、表征及体外评价本章研究了CuA自乳化纳米乳(CuA-SEN)和基于Cremophor-EL的CuA胶束(C-CuA-M)两种新型CuA制剂的制备、优化、表征和体外释放研究。通过BBD法成功优化并制得CuA-SEN和K-CuA-M纳米载体。所得的CuA-SEN体系均一、平均液滴尺寸=48.83±1.06 nm、PDI=-0.232±0.140、zeta电位=-29.92±1.66 mV、包封率EE=-91.51±0.44%;采用二次模型计算载药量(DL)为=9.77±0.75%。而且,CuA-SEN相对稳定,通过Fickian扩散机制显著增加CuA的体外药物释放(IVDR)。同时,C-CuA-M的最佳工艺为CuA(0.41 g),Cremophor-EL(0.60 g)和水(5.0 mL),所得胶束尺寸大小=55.14±3.79 nm,PDI=0.366±0.015,zeta电位=-15.17±2.19 mV。此外,C-CuA-M具有合适的包封率(88.45±1.42%)和载药量(8.43±0.86%)。与CuA-SEN相比,C-CuA-M体外释放率略低,且相对稳定。总之,CuA-SEN和C-CuA-M这两种制剂都具有良好的理化特性和稳定性,体外释药性能也得到了改善。第四章三酰基甘油结合的石榴酸-枯茗醛纳米制剂提高生物利用度及抗肝毒素药效本章考察了所带制备的TPA和CuA纳米制剂,即TPA-NS、TPA-NL、CuA-SEN和C-CuA-M的口服生物利用度,有效提高口服生物利用度。选择理化特性和口服生物利用度较好的制剂,对CCI4诱导小鼠肝损伤进行抗肝毒性活性评价。相对而言,TPA-NL(164.14%)较游离TPA和TPA-NS(124.22%)具有更好的口服生物利用度。更重要的是,体内研究表明:TPA-NL(2mg/kg体重)能够通过抑制炎症、减少氧化应激和恢复肝功能等机制,增强对CCI4诱导的肝损伤的肝脏保护作用。综上所述,TPA脂质纳米制剂显著提高了TPA的抗肝毒性作用。同样,CuA-SEN与游离CuA和C-CuA-M相比,血药浓度显著增加,相对口服生物利用度提高(171.45%)。体内实验结果表明:CuA-SEN(200 mg/kg体重)能够显著提高血清谷胱甘肽、SOD、CAT和TNF-α+ il-6(血清和肝组织),同时降低AST,ALT和MDA的水平。因此,通过SEN提高CuA的生物利用度是提高该药物抗氧化、抗炎和抗肝毒性的有效手段。综上所述,通过适当脂质纳米制剂,可以提高大分子TPA和小分子CuA的生物利用度,增强其抗肝毒性活性,在保肝护肝以及肝脏疾病治疗方面具有广阔前景。