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近年来鲍类养殖存活率急剧下降,种质退化和大规模疾病的发生成为重要原因。为此,开展基础研究迫在眉睫,对遗传背景的研究已成为解决实践问题的前提。本研究以杂色鲍(Haliotis diversicolor diversicolor)与皱纹盘鲍(H.discushannai)及其杂交子代为实验材料,应用荧光原位杂交(Fluorescence in situhybridization,FISH)技术和基因组原位杂交(Genome in situ hybridization,GISH)技术对它们的染色体进行研究,从而丰富它们的细胞遗传基础信息,并对得到的实验结果在染色体鉴别、进化分析以及基因特点等方面的潜在应用价值进行讨论,主要结果如下: 1、酪胺信号放大-荧光原位杂交(TSA-FISH)方法结合了酶联反应和FISH技术的优点,使FISH灵敏度显著提高。应用TSA-FISH与常规FISH方法对杂色鲍与皱纹盘鲍的端粒序列进行染色体定位,发现TSA-FISH信号比常规FISH更加强烈。并应用TSA-FISH方法定位杂色鲍和皱纹盘鲍的rDNA,发现18SrDNA定位于杂色鲍第3、4对染色体的短臂端部,5SrDNA定位于杂色鲍第4、10和15对染色体的区域以及皱纹盘鲍第2、6、8和11对染色体的区域。杂色鲍与皱纹盘鲍的18SrDNA和5SrDNA在染色体上的位点和数目均存在多态性。 2、应用TSA-FISH技术对杂色鲍的四种功能基因进行染色体分析,它们分别是谷氨酸脱羧酶(GAD)基因、MAPK互作激酶(MNK)基因、胰岛素相关多肽受体(IRR)基因和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)基因。杂色鲍GAD基因信号点主要分布于M染色体上,在第3、5、6和8对染色体上,而且在第5对染色体上有双信号点。杂色鲍MNK基因信号点也主要分布在M染色体上,在第1、3、6和7对染色体上。杂色鲍IRR基因信号位点除了在M染色体上存在,在唯一的ST染色体的长臂端部上也有分布,分别是第4、6和16对染色体。同时,FGFR基因信号簇位点也存在于M染色体上,和ST染色体长臂端部,分别是第5、6和16对染色体。这四种功能基因的染色体定位都存在多态性特点,而且有共同的分布点,GAD与IRR基因共同存在于第6对染色体的长臂端部,在第6对染色体的着丝粒和长臂上有两个MNK基因信号点,FGFR基因在第6对染色体短臂端部,另外IRR基因与FGFR基因共同存在于第16对染色体的长臂端部上。这说明杂色鲍不同染色体上可能存在基因多倍性,为染色体进化和基因特点提供基础信息。 3、以杂色鲍与皱纹盘鲍杂交子代的早期幼体为实验材料,应用GISH技术对亲本染色体的数目和组成进行检测。发现杂交子代幼体拥有来自于亲本的染色体,但仅仅31%包含完整的亲本染色体,远远低于亲本自交的染色体完整性,暗示着杂交子代基因组不稳定。在杂交子代细胞中,包含完整杂色鲍(母本)染色体的频率是高于包含完整皱纹盘鲍(父本)染色体的频率,说明有父本染色体倾向性丢失的现象。而且杂交子代细胞中有大量来自于皱纹盘鲍(父本)的染色体片段和滞后的染色体,更加验证了父本染色体倾向性丢失。因此本文对鲍类种间杂交的染色体丢失提供证据。