第一部分痕量caldesmon对肌球蛋白功能的非Ca2+依赖性调节作用 Caldesmon(CaD)是一种CaM(calmodulin)结合蛋白、是平滑肌细肌丝的组成成分之一、也是平滑肌收缩与舒张的调节因子。已知CaD能够抑制肌动蛋白激活的肌球蛋白ATP酶活性，这种抑制在Ca2+和CaM存在时能够被反转。近年来，又发现CaD对肌球蛋白具有直接调节作用。我们的研究结果显示了痕量CaD能够与肌球蛋白相互作用。在CaD与肌球蛋白的最低比率是1/10000的条件下，也能显著增加未磷酸化肌球蛋白，Ca2+/CaM依赖性磷酸化的肌球蛋白，Ca2+/CaM非依赖性磷酸化的肌球蛋白的沉淀。痕量CaD可提高肌球蛋白的ATP酶活性；但是对于PKA磷酸化的肌球蛋白无明显影响；CaD与肌球蛋白之间的这种高效的相互作用可能参与肌球蛋白功能的调节。 第二部分重组多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ(MyosinⅡ)Ca2+抑制作用研究肌球蛋白Ⅱ可分为3类：非调节的、可磷酸化的和Ca2+离子结合蛋白。多头绒泡菌和扇贝的肌球蛋白Ⅱ都属于Ca2+结合蛋白，且两者的亚单位组成相似，可是Ca2+对多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ活性起抑制作用，而对扇贝肌球蛋白Ⅱ活性起激动作用。为揭示何种亚单位决定了Ca2+对多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ活性起抑制作用，本研究采用昆虫细胞(sf-9)表达系统成功地表达了重组多头绒泡菌HMM(heavymeromyosin，HMM)，全长的肌球蛋白Ⅱ及杂合的肌球蛋白Ⅱ。已经发现Ca2+对重组多头绒泡菌肌球蛋白ⅡMg2+-ATPase活性起抑制作用，而且肌球蛋白的尾部轻酶解肌球蛋白(lightmeromyosin，LMM)对Ca2+的敏感性有一定的影响。为了进一步研究及确证重组多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ的特性，探讨多头绒泡菌肌球蛋白ⅡCa2+抑制发生的机制，本实验采用体外肌丝滑动试验来观察肌球蛋白的何种亚单位在Ca2+抑制效应中起作用，对其不同重组蛋白的运动性做了初步研究，并且考察了Ca2+离子对不同重组肌球蛋白Mg2+-ATPase的影响，结果表明： (1)Ca2+离子能够抑制重组多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ推动的肌动蛋白的运动，但是对于含有变异的Ca2+结合轻链(不能结合Ca2+离子)的肌球蛋白没有抑制作用，表明Ca2+结合轻链在Ca2+调节中是必须的。 (2)不同轻链的肌球蛋白的Mg2+-ATPase活性测定表明，多头绒泡菌磷酸化轻链(phosphorylatablelightchain,PLC)与Ca2+结合轻链(Ca-bindinglightchain,CaLC)同时存在时，Ca2+抑制作用最大；而扇贝磷酸化轻链(regulatorylightchain,RLC)与Ca2+结合轻链(essentiallightchain,ELC)同时存在时，没有抑制作用。Ca2+对于四种不同的肌球蛋白的抑制结果如下，PLC,CaLC＞RLC,CaLC＞PLC,ELC＞RLC,ELC。 以上的结果表明Ca2+抑制重组多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ推动的肌动蛋白的运动，初步证明了PLC和CaLC在Ca2+调节中是必须的。