SCN5A对大鼠GH3细胞生物学特性的影响

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目的:生长激素型垂体腺瘤(Growth Hormone pituitary adenomas,GHPAs)作为一种常见的激素分泌型垂体腺瘤,其发病率正在逐年上升。多达20%的GHPAs向周围组织表现出侵袭性的行为,这就导致GHPAs手术治疗后容易复发。本研究的目的是探讨SCN5A在GHPAs中的作用,进一步了解GHPAs的发生发展机制为临床的治疗提供新的策略。方法:(1)在GH3细胞系中通过慢病毒感染构建SCN5A敲低的稳转株,通过q RT-PCR和Western-blot技术筛选出敲低效率最高的一组sh RNA进行后续实验;(2)然后通过cck-8、集落克隆、Transwell、划痕实验、ELISA等方法检测SCN5A敲低对GH3细胞增殖活力、侵袭和迁移、生长激素分泌的影响;(3)同时采用q RT-PCR和Western-blot技术检测SCN5A敲低后基因VEGFA的表达效率;(4)最后通过在体实验,检测敲低基因SCN5A对垂体腺瘤成瘤的影响作用。结果:(1)q RT-PCR(P﹤0.001)和Western-blot(P﹤0.0001)技术筛选出sh-SCN5A-3敲低效率最高;(2)细胞实验表明,与对照组相比,实验组的细胞增殖能力降低(P<0.05)、侵袭及迁移的能力降低(P<0.01)、生长激素分泌量降低(P<0.01);(3)细胞实验表明,与对照组相比,实验组VEGFA的蛋白表达量(P<0.001)和m RNA的表达量(P<0.01)均较低;(4)裸鼠成瘤实验中,与对照组相比较,实验组的瘤体体积较小(P<0.05),重量较轻(P<0.01)。结论:SCN5A促进GH3细胞的增殖、侵袭迁移、生长激素分泌;VEGFA参与了SCN5A对GH3细胞的作用。
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