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目的:①建立基于含药血清及MΦ模型的抗结核杆菌药物活性评价方法;探讨含药血清及MΦ模型在抗结核杆菌药物活性评价中的应用;②利用含药血清及MΦ模型,结合传统MIC方法共同评价中药短萼海桐提取液的抗结核杆菌活性,进一步探讨含药血清及MΦ模型,在中药抗结核杆菌活性评价中的应用。 方法:①以小鼠腹腔MΦ的TB感染模型与异烟肼含药血清的共培养体系,作为抗结核药物活性的评价体系,以异烟肼含药血清与感染MΦ共同培养数天后,破碎MΦ释出其内存活的结核杆菌进行体外培养,通过最终形成的菌落数,反映异烟肼抗结核活性在该评价体系中的表达情况。设血清及空白对照组。评价结果以传统MIC结果作参照。②应用短萼海桐提取液的含药血清及MΦ的TB感染模型评价短萼海桐的抗结核杆菌活性,设阳性(异烟肼)及阴性(空白、血清)对照组;再采用传统最低抑菌浓度测定法,即二倍稀释法测定短萼海桐提取液的MIC值,结合体内抗结核实验,对应用短萼海桐提取液的含药血清及MΦ的TB感染细胞模型获得的评价结果予以验证;③通过台盼兰染色后记数活细胞百分率,反映不同浓度药物及含药血清与细胞共同培养后对细胞活力的影响。 结果:①在感染TB的MΦ与异烟肼或其含药血清共同培养数天后,异烟肼含药组及含药血清组MΦ中存活的细菌数,与对照组比较均有显著减少(p<0.01),异烟肼的抗结核活性在该体系中得到充分反映;②短萼海桐提取液在其含药血清及MΦ感染模型组成的评价体系中,能使MΦ中的感染细菌存活数明显减少。表现为:在感染TB的MΦ与短萼海桐提取液或其含药血清共同培养数天后,中药高剂量血清组能使MΦ中存活的细菌数显著减少(p<0.01);③台盼兰染色后记数活细胞的百分率,各实验组活细胞的百分率均低于对照组(p<0.01),且含药组低于其相应血清组(p<0.01)。 结论:①应用含药血清及MΦ模型能对药物的抗结核杆菌活性进行评价。为抗结核药物研究提供了新的方法和手段;②通过含药血清及巨噬细模型能反映出短萼海桐的抗结核杆菌活性,且这种活性可能通过其有效成分对感染细胞免疫功能及其内细菌的整体作用得以发挥;利用含药血清及巨噬细模型可以对中药短萼海桐抗结核杆菌活性及其浓度与细胞毒性的关系等作出较全面的评价。