研究背景：复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）是指发生在妊娠28周之前连续3次和3次以上的自然流产，且不存在弓形虫等生殖道感染、内分泌、子宫附件解剖异常、自身免疫功能异常，以及染色体异常等病因。自然流产是指除人为因素，由某些原因所致胚胎或胎儿从母体自动脱离的现象。现今我国由于人们周围环境污染辐射等的影响和生活方式的改变，使得复发性流产的发生率逐年升高。造成RSA的原因有很多，目前大致可分为非免疫性和免疫性两类。非免疫因素包括遗传因素(包括染色体异常)、解剖结构畸形、感染因素、内分泌因素、微量元素缺乏等。免疫因素可分为两类：自身相关型和同种免疫型，同种免疫型包括原因不明型。自身相关型具有重要作用的有抗磷脂抗体（APA）、抗精子抗体（ASA）等。同种免疫型中起重要作用的有T淋巴细胞、NK细胞等。临床常用T淋巴细胞活化比率来表示封闭抗体，作为检测指标。封闭抗体缺乏可视为T淋巴细胞活化比率不足。不足以使母体对胚胎等妊娠组织产生免疫耐受，导致父系抗原被母体免疫系统识别而杀伤，使胚胎受到免疫攻击而流产。所以对于妊娠的健康妇女，具有相当数量的调节性T淋巴细胞非常重要，可使母体对胚胎（半同种异体抗原）产生免疫耐受，发挥免疫防护作用，利于妊娠;如果外周血中调节性T淋巴细胞的数量减少，胚胎就会遭受免疫系统攻击，使母体对胚胎的免疫耐受力降低，导致流产发生。现国内外研究淋巴细胞免疫疗法是治疗封闭抗体阴性复发性流产患者的有效方法，可提高患者妊娠率[15-18、35-38]高达90%[33-34]。淋巴细胞免疫疗法即采用丈夫或者健康男性（第三者）的外周血，经过离心后将男方的血清淋巴细胞注入患者皮下组织，使患者被动的产生自身免疫调节，从而使外周血中的调节性T淋巴细胞的数量增加，诱导母体产生免疫耐受，当其再次妊娠时，就可以减少对胚胎半同种异体抗原的免疫攻击，故可保护胚胎，维持妊娠。但其治疗过程长，治疗后转阳与未转阳对于是否可以成功妊娠的有效率不肯定，本论文在排除复发性流产患者子宫缺如、双侧输卵管阻塞、阴道缺如等解剖因素；弓形虫、风疹病毒、HPV等感染因素；抗心磷脂抗体阳性、抗核抗体阳性、抗甲状腺抗体阳性等免疫因素，男方性功能障碍、先天性精子畸形等男方因素，及多囊卵巢综合症、卵巢早衰、高泌乳素血症等内分泌因素等影响妊娠的因素后，对封闭抗体阴性的RSA患者主动免疫治疗前、后采用流式细胞检测仪测定外周血T淋巴细胞(CD3+、CD4+和CD8+)封闭效率，分析其变化，了解免疫治疗后转阳与未转阳的治疗效果，并且进一步探讨测定T淋巴细胞（CD3+、CD4+和CD8+）的封闭效率在临床上RSA中的诊治价值。目的：1.通过观察复发性流产患者免疫治疗前后外周血中CD3+、CD4+和CD8+封闭效率的变化，了解免疫治疗的效果。2.分析免疫治疗前后外周血中T淋巴细胞（CD3+、CD4+和CD8+）封闭效率与妊娠结局的关系，进一步探讨其在RSA中的诊治价值。资料与方法：1研究对象2010年10月—2012年10月就诊于郑州大学第三附属医院生殖中心，封闭抗体为阴性接受主动免疫治疗的复发性流产患者300例，其中放弃治疗的有58例(因患者个人原因)，随访失败的有60例（因联系方式更改），数据有效纳入分析的有182例，年龄36±10岁，其中26-36岁89例，37-46岁93例。自然流产次数和例数：6次24例，5次37例，4次34例，3次87例。2研究方法对复发性流产患者采用双荧光标记流式细胞分析技术，以患者丈夫(或与患者无血缘关系健康男性)的淋巴细胞为抗原靶标，测定患者外周血中T淋巴细胞CD3+、CD4+和CD8+的封闭效率（如CD3+、CD4+和CD8+中有一项负值，则诊断为封闭抗体缺乏，纳入治疗范围）。对接受治疗的患者检测其治疗前、后外周血T淋巴细胞中的CD3+、CD4+和CD8+的封闭效率，并对其治疗后转阳与未转阳成功妊娠的结果进行观察和统计分析。3统计学方法将相关变量进行编码后录入Excel表格。采用统计学软件SPSS17.0进行统计学处理，经正态性检验，如数据不服从正态分布采用秩和检验进行分析；定量资料采用中位数和四分位数间距进行描述，检验水准α=0.05。结果：1.RSA患者主动免疫治疗后,外周血T细胞中的CD3+、CD4+和CD8+的封闭效率高于治疗前（P<0.05）。2.182例患者治疗结局中未转阳的患者与转阳的患者CD3+、CD4+和CD8+治疗前、后的值比较有显著差异（P<0.05），且治疗后转阳的患者外周血中CD3+、CD4+和CD8+的值高于治疗后未转阳的患者（P<0.05）。3.182例患者治疗后妊娠的有37例。其中未转阳的有133例，妊娠的有22例；转阳的有49例，妊娠的有15例。转阳和未转阳患者的妊娠率分别为：31%、17%（P<0.05）。结论：1.对RSA患者外周血CD3+、CD4+和CD8+封闭效率的检测可成为评价免疫治疗效果的有效指标之一，在临床上具有诊治价值。2.主动免疫治疗可以提高RSA患者外周血中CD3+、CD4+和CD8+的封闭效率，治疗后转阳可以提高成功妊娠率。