应用反向斑点杂交法对结核分枝杆菌耐药的检测

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第一部分反向斑点杂交方法的建立目的:建立一种灵敏、特异、快速检测结核分枝杆菌(tubercle bacillus, TB)耐药相关基因突变的反向斑点杂交法(Reverse Dot Blot, RDB),用于临床对利福平,异烟肼耐药的快速诊断。方法:设计的用来检测耐药的探针包括:5条野生型和7条突变型探针用来检测利福平耐药,2条野生型和3条突变型探针用来检测异烟肼耐药并将其固定在尼龙膜上,使用生物素标记的特异性引物扩增并将PCR产物与固定在膜上的寡核苷酸探针杂交并对购买自北京药品生物制品研究所
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