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大口黑鲈（Micropterus salmoides）,又名加州鲈,自20世纪70年代引入我国,经过多年的研究和养殖,已经成为我国重要的淡水名贵鱼类,大口黑鲈鱼养殖对饲料蛋白要求较高,容易造成水体的污染,近年来为了减少养殖污染,各地响应拆除网箱、绿色生态养殖等政策,大口黑鲈养殖模式正处在急需调整的路口。本研究拟通过EM（Effective Microorganisms）的添加和蟹鲈混养的方式对大口黑鲈绿色生态养殖模式进行探究,试验共设置4个养殖组蟹鲈混养组（XL）,EM蟹鲈混养组（ML）,EM单养鲈鱼组（EL）和单养鲈鱼组（L）,每组设置3个重复,试验周期为180 d。通过测定养殖水体水质、大口黑鲈生长、抗氧化、免疫、肌肉品质等指标,以期为大口黑鲈绿色生态优质养殖模式的推广提供科学参考。1.有效微生物菌群（EM）对大口黑鲈养殖池溏水体菌群结构的影响16S r RNA基因高通量测序结果显示:实验期水体主要优势菌门为拟杆菌、变形菌、放线菌、蓝细菌等,其中拟杆菌为EL组在Ⅲ期和Ⅳ期的丰度最高菌,丰度分别为42.07%、38.52%,而L组在Ⅲ期和Ⅳ期丰度最高菌为放线菌,丰度分别为71.83%%、31.37%;蓝细菌在EL组的养殖前期丰度较大,但在后期（Ⅲ期和Ⅳ期）丰度小于1%,而L组在整个采样期,蓝细菌丰度都大于1%;在Ⅲ期和Ⅳ期,实验组水体中分支杆菌属相对丰度极显著低于对照组（P＜0.01）。pd指数显示,EL组在Ⅰ期（4月份）多样性pd指数显著低于对照组（P＜0.05）,而在Ⅲ期（7月份）的多样性pd指数及其显著高于对照组（P＜0.01）。PCo A和聚类结果显示,在养殖实验后期（Ⅲ期和Ⅳ期）EL组相比较于L组,距离更近,样品间重叠,并聚为一类。分析表明,添加EM可以改善养殖水体水质,改变养殖水体的菌群结构,增加水体菌群多样性,减少病原菌的丰度,对蓝藻有一定的控制和抑制效应,养殖水体的微生态系统稳定性有所提高。2.EM对蟹鲈混养模式下养殖水体菌群结构的影响高通量测序结果显示,实验期间水体主要优势菌门为变形菌门、放线菌门、厚壁菌门、蓝细菌门,其中对照组蓝细菌门的相对丰度在Ⅲ、Ⅳ期显著高于实验组;实验组Ⅰ期最优势菌属为Limnohabitans（20.34%）,其余时期皆为微小杆菌属（56.33%、38.11%、17.88%）;对照组Ⅰ期最优势菌属为红育菌属（10.37%）,Ⅱ期为微小杆菌属（47.67%）,Ⅲ期和Ⅳ期皆为分枝杆菌属,分别为36.01%和42.27%;Sobs和PD指数显示:实验样品在Ⅰ期、Ⅱ期差异不显著,但在Ⅲ期和Ⅳ期实验组显著高于对照组。相比于对照组,添加EM的实验组在整个监测期总氮（TN）显著降低,氨氮（NH4+-N）在Ⅰ期差异不显著,在Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期显著降低。关联分析显示,总氮是对菌群群落影响程度最大的环境因子,其中添加EM实验组的优势菌属微小杆菌属与总磷（TP）呈正相关,与TN、NH4+-N、NO3--N、NO2--N呈负相关;本研究表明蟹鲈混养模式下定期添加EM可以改善养殖水体水质,有效抑制蓝细菌,且显著优化菌群结构,具有显著的水体原位修复功能。3.EM添加及混养模式对大口黑鲈生长、抗氧化及免疫能力的影响在大口黑鲈养殖池塘中定期泼洒EM,其养殖大口黑鲈的体质量和增重率有所提高,但是效果不显著（P＞0.05）;肝脏抗氧化及免疫指标测定结果表明EL组大口黑鲈肝脏SOD、CAT、GSH-Px显著高于L组（P＜0.05）;在养殖前期L组肝脏ACP活力显著高于EL组,后期EL组高于L组,但是差异不显著（P＞0.05）,EL组AKP始终显著高于L组（P＜0.05）。ML组终末体质量和增重率显著高于EL组。血清生理生化指标测定结果显示ML组血清LDH、AST在养殖前期显著高于EL组,ALP则显著低于EL组（P＜0.05）。肝脏抗氧化及免疫指标测定结果显示,ML组大口黑鲈肝脏SOD活力显著高于EL组,而EL组GSH-Px显著高于ML组（P＜0.05）;在养殖前期CAT无显著差异（P＞0.05）,后期ML组显著高于EL组;ML组肝脏ACP活力在前期显著高于EL组,但后期无显著差异,ML组AKP活力始终显著高于EL组（P＜0.05）。研究表明EM添加可以显著提高大口黑鲈的免疫、抗氧化能力,混养模式下大口黑鲈的免疫、抗氧化能力进一步提高。4.EM添加及混养模式对大口黑鲈肌肉品质的影响肌肉基本成分和游离氨基酸测定结果显示,EL组和L没有显著的差异（P＞0.05）,L组大口黑鲈背肌水解氨基酸中精氨酸显著高于EL组（P＜0.05）,其它氨基酸则无显著差异。EL组饱和脂肪酸月桂酸、肉豆蔻酸显著低于L组,单不饱和脂肪酸芥酸显著低于对照品组,多不饱和脂肪酸花生二烯酸显著高于对照组（P＜0.05）;核苷酸测定结果显示2个养殖组之间无显著差异（P＞0.05）。ML组和EL组背肌中各水解氨基酸含量无显著差异,但是游离氨基酸测定结果显示EL组游离氨基酸中天冬氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、缬氨酸等含量显著高于ML组（P＜0.05）。ML组中多不饱和脂肪酸中亚麻酸和二十碳二烯酸显著高于EL组（P＜0.05）,而EL组中饱和脂肪酸肉豆蔻酸显著高于ML组。ML组大口黑鲈背肌鸟苷酸含量显著高于EL组。研究表明EM添加对大口黑鲈鱼肌肉品质的改善具有积极作用;混养模式下大口黑鲈规格更大,抗氧化和免疫能力也更强,其肌肉品质也更好,但是其风味品质会有一定的丧失。