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硒对人体代谢功能有重要作用,全世界有40多个国家和地区不同程度地缺硒。用亚硒酸钠之类的无机硒补硒具有一定的毒性,一般只用于医药品;通过食物链补硒是解决缺硒人群的重要途径,但是天然食物中的硒含量普遍较低,开发利用富硒食品日益受到关注。茶叶是世界人民的三大饮料之一,紫阳茶中硒含量丰富,是国内首个通过科学鉴定的天然富硒茶。但是文献研究表明,通过两次冲泡紫阳茶,结果仅能吸收约占总硒7%~13%的水溶性硒,远不能满足人体补硒需求。针对以上问题,本课题对茶叶中硒的形态进行了初步分析,确定硒含量相对最高组分,进而对该富硒组分的提取工艺进行了优化,试图为研究和开发天然安全的富硒功能食品提供理论依据。试验运用紫外分光光度法,以邻苯二胺为络合剂,在331nm检测波长处,考察了邻苯二胺用量、络合pH等因素对分析结果的影响,建立了茶叶中硒的分析检测方法。应用该方法测定了紫阳富硒茶中微量元素硒的含量,并对茶叶中硒的形态分布进行了初步研究。结果表明,硒测试最佳条件为:0.2%邻苯二胺2.5mL,5%EDTA-2Na为2.0mL,pH=2.0,室温下避光反应60min。在此条件下,吸光度与浓度之间呈良好的线性关系(R2=0.9989),平均回收率为101.9%,RSD为2.2%,说明此方法测定硒含量有较好的重现性且方法可行。运用该方法分别测定了茶中蛋白质、茶多糖以及茶多酚中的硒含量,结果表明,碱溶性蛋白是紫阳富硒茶中硒的主要赋存形态。为优化碱法提取硒蛋白的工艺条件,在单因素试验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合试验设计及响应面分析方法,考察了碱液浓度、提取温度以及液固比3因素对硒蛋白提取率的影响,得出提取效果的回归模型。为研究超声辅助浸提茶叶中硒蛋白的工艺条件,在单因素试验的基础上,设计了超声功率、提取温度、液固比和碱液浓度4因素3水平的正交试验,得出了超声辅助的最佳提取工艺条件。结果表明:(1)碱法最佳工艺参数为:碱液浓度0.09mol/L,提取温度67℃,液固比55:1(mL:g),每次提取3h,提取2次,在此基础上硒蛋白提取率为56.52%,硒含量为4.89μg·g-1,占茶叶总硒含量的41.0%。(2)超声辅助浸提最佳工艺参数:0.12mol/L的NaOH溶液,在70℃,液固比为1:70,超声功率为100W的条件下浸提50min,提取2次,在此基础上硒蛋白提取率为71.87%,硒含量为5.09μg·g-1,占茶叶总硒含量的46.67%。