前言 突变的p53蛋白表达是反映细胞增殖活性的生物学指标之一。近年来已逐渐应用于心血管疾病的研究。无论是家族性肥厚型心肌病(HCM)，还是散发性HCM在其发病过程中，是否有p53蛋白参与还不清楚。本文通过免疫组织方法对肥厚型心肌病组及正常对照组外周淋巴细胞中p53表达情况进行检测，以探讨肥厚型心肌病的心肌肥厚与p53蛋白表达之间关系，并进一步研究肥厚型心肌病的发病机制提供新的理论思路。 材料和方法 病例选自2001年4月至2001年12月中国医科大学附属第一医院及辽宁省人民医院的病人，经彩色超声心动图机检查证实为肥厚型心肌病的病人共24例，并进一步分为梗阻性HCM亚组和非梗阻性HCM亚组。正常对照组20例经询问病史、体检、胸片、血象、心电图、彩色超声心动图检查无高血压病、心脏瓣膜病及各种肿瘤、白血病的病人。标本的采集后，离心、涂片、干躁、固定，置-70℃冰箱中保存备用。p53蛋白用免疫组化染色法测定，免疫组化结果判定为：p53的染色阳性物质呈棕黄色颗粒状，主要位于细胞核，偶见于胞浆。参照Aoki和Singhans等的方法，综合考虑切片中阳性标记组织占所观察同类细胞总数的百分比和阳性标记细胞着色强度等两项指标的差异，分别记为(-)、(+)(++)、(+++)四个等级(表2)。判定标准为(-)……(+)为阴性，(++)……(+++)为阳性，阴性对照中相应细胞均不着色。资料统计学处理时，肥厚型心肌病组与正常对照组p53表达的比较采用X？检验，梗阻性 HCM亚组与非梗阻性 HCM亚组的 p53表达比较采用四格表的确切概率法，肥厚型心肌病患者p53表达水平与室间隔肥厚程度之间关系采用秩相关系数判断。 实验结果 一周厚型心肌病与正常对照组p53表达的对比 肥厚型心肌病与正常对照组p53的阳性表达率分别为10％。62．5防，两组间比较有显著性差异瞩＜0刀1八 二、梗阻性肥厚型心肌病与非梗阻性肥厚型心肌病一 表达的对比。 梗阻性 HCM亚组与非梗阻性 HCM亚组 p53蛋白表达的阳性率分别为75．0％和62．5％，经四格表确切概率法进行组间比较u叩·05X无显著性差异。 三伯厚型心肌病病人p53表达水平与室间隔肥厚程度之间关系。 肥厚型心肌病的 P53蛋白表达率（％）及相应的室间隔厚度（rum）的rs＝0．675u＜0．05）提示肥厚型心肌病病人一 表达率与室间隔厚度之间在统计学上呈正相关。 讨 论 目前病因学研究证实55％左右的HCM与常染色体的遗传突变有关，父母无基因异常而发病的散发型HCM占总数的45％，散发性HCM仅少数学者报告少数病人为p－MHC基因突变，大部分病因仍不清楚，有待人们进一步探索。最近Akira Matsurnori研究发现散发性HCM与丙型肝炎病毒（HCV）感染有关，他认为HCV引起的生长性刺激可致HCM。总的看来，一种理论不能解 ·2·释全部HCM病人的发病机理，Anan R等认为可能是多因素或环境因素与遗传因素共同作用所致。 正常的P53蛋白在细胞中易水解，半衰期20分钟左右，因此几乎在所有的体细胞中均可检测到P53蛋白的存在，但处于较低水平。野生型P53蛋白质的主要功能是抑制细胞的生长，如果它一旦和某些肿瘤病毒蛋白在结合或者因为各种基因改变导致p53基因突变，将成为突变型的P53，则会刺激和促进细胞的生长，而突变型 P53是由半衰期延长，并能稳定在 P53蛋白的较高水平上，故用免疫组化方法检测到的p53蛋白代表了突变型p53蛋白的表达。 本研究应用免疫组化法检测肥厚型心肌病患者外周淋巴细胞中P53蛋白的表达，结果表明24例肥厚型心肌病患者15例呈阳性表达，阳性率为 62．5％。20例正常对照组中 2例呈阳性表达，阳性率为10％，两者比较有统计学差异河＜O．0U，肥厚型心肌病外周把细胞P53蛋白阳性表达率显著高于正常对照组。顾我们p53基因的突变与肥厚型心肌病的发生，演进可能具有某些重要的内在关系。 HCM的流出道梗阻仅出现在大约25％的病人，它对HCM预后意义没有多大帮助。根据nmeh FnanaPazir报告，在两个403峋（‘下一MHC基因突变的家系中，一个朝鲜的家系中多数病人有左室流出道梗阻，而在高加索家系中所有家人均为非梗阻性肥厚型心肌病，其明显的临床表型强调了修饰基因和非基因因素的重要性。P53基因是否为修饰基因尚不清楚，但我们可以观察它的表达在左室流出道（LVOF）梗阻和非左室流出道梗阻之间有无差别，为此在本实验中我们比较了梗阻性HCM亚组和非LVOF梗阻性HCM亚组外周血淋巴细胞中 P53蛋白表达情况，结果两表达率之间无统计学上的显著性差别评＞0．05）提示 p53蛋白的表达率与LVOF在本实验条件下无法建立联系。 ·3· 为研究室间隔肥厚程度在HCM病人中的意义，SPintO和Maron在一项29例无症状或仅有较微症状的HCM i死病人的研究显示在心脏摔死者中左室肥厚明显高于对照组，严重的心肌肥厚包括室间?