生长抑素在斑马鱼胰腺中的表达及敲降对其发育的影响

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生长抑素(Somatostatin,SS)是广泛存在于脊椎动物中的结构多样的肽激素家族,在脊椎动物的生长、发育和新陈代谢的多个方面发挥多种生物功能。生长抑素由多种细胞和组织产生,包括上皮细胞,神经元细胞,免疫细胞,胰腺,胃肠道,中央和周围神经系统,以及甲状腺组织。研究显示,SS1、SS4在斑马鱼早期胚胎期发育阶段表达,SS4主要在胰腺中表达。在前面的研究中我们克隆了SS3 cDNA,并且确定了SS3 mRNA在胚胎头底部细胞中短暂表达,而在胰腺中持续表达。本研究首先用双色原位杂交技术分析了SS3与其它胰腺表达基因如SS4、胰岛素(insulin,ins)、胰高血糖素(glucagon,gcg)以及转录因子islet1的共表达模式,然后通过特异MO分别敲降SS3、SS4以及双敲降分析了SS3,SS4的缺失对胰腺发育的影响,为研究SS在胚胎发育中的功能提供基础。SS3与其它胰腺标记基因mRNA双色原位杂交分析显示,在22 hpf,SS3的表达区域与ins的表达区域有部分的重叠,在一部分的SS3的表达区域,ins强烈的表达,而在30 hpf和48 hpf,ins主要在核心区域表达,SS3的表达包围着ins表达。在48 hpf,少量的SS3表达细胞与isletl表达细胞共表达;SS3和SS4有部分的共表达,其共表达部位主要在外围;而大部分的SS3表达细胞都共表达gcg。通过SS3 MO或SS4 MO注射,分别敲降了胚胎SS3或者SS4的表达,然后检测了SS4和SS3的交互表达变化。在SS3敲降胚胎中,(?)SS4 mRNA表达细胞的范围扩大;而在SS4敲降胚胎中,SS3 mRNA表达细胞的范围扩大;但是无论在SS3morphant中还是SS4 morphant中,gcg-表达细胞的数量和ins-表达细胞的数量都没有变化。接着共注射SS3 MO和SS4 MO,我们同时敲降了SS3和SS4的表达,在SS3和SS4同时敲降的胚胎中,gcg-表达细胞的数量和ins-表达细胞的数量都显著减少。以上研究表明,SS3和SS4在调控胰腺发育过程中很可能具有互相调节机制,SS很可能参与调控斑马鱼内分泌胰腺的形成。
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