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目的:通过对血管性痴呆(Vascular dementia，VD)模型大鼠微管相关蛋白1轻链3(mi-crotubule-associated protein1 light chain3，MAP1-LC3,LC3)、自噬相关蛋白Beclin-1、自噬小体、细胞凋亡指数(Apoptotic Index，AI)及血液流变学的观察，研究祛风通窍方对VD大鼠自噬、凋亡及血液流变学的影响，初步探讨祛风通窍方对VD大鼠的保护机制。
方法:1）动物分组:健康雄性SD大鼠90只，永久性结扎双侧颈总动脉(2-VO)法制备VD模型，以Morris水迷宫实验作为筛选标准，将符合要求的SD大鼠按随机对照表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组（西药组）、祛风通窍方高剂量组（高剂量组）、祛风通窍方中剂量组（中剂量组）、祛风通窍方低剂量组（低剂量组）各12只。假手术组只分离双侧颈总动脉(Commoncarotid artery，CCA)不结扎。2）给药:西药组给予尼莫地平6.25mg/kg/d浓度混悬液灌胃，高、中、低剂量组分别予以相当于祛风通窍方生药26.8g/kg/d、13.4g/kg/d、6.7g/kg/d的浓缩液灌胃，假手术组、模型组予以生理盐水灌胃，每天1次，每次3ml，连续喂养30天。3）标本采集:1％戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉，仰卧固定，开胸，快速心脏取血(5ml)，注入抗凝管内，用于血流变学检测;随机抽取5只大鼠断头处死，取新鲜脑组织PE管中-70℃保存备用;7只大鼠心脏灌注内固定，断头取脑，固定、脱水、包埋制成切片。4）观察指标:Morris水迷宫试验检测VD大鼠学习记忆功能;电镜观察神经元细胞超细微结构;Western Blot法检测自噬相关蛋白LC3表达;免疫组化检测Beclin-1蛋白表达;原位末端标记法（TUNEL法）检测海马神经元AI;流变快测仪检测血液流变学指标。
结果:1）Morris水迷宫实验:与假手术组比较，模型组及各药物干预组逃避潜伏期（escape latency，EL）均延长，平台象限停留时间缩短，跨越虚拟平台的次数减少，差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组比较，西药组、高、中剂量组EL逐渐缩短，平台象限停留时间延长，跨越虚拟平台次数增加，差异有统计学意义(P＜0.05);低剂量组EL有所缩短，平台象限停留时间有所延长，跨越虚拟平台的次数有所增加，但与模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。与西药组比较，高剂量组EL缩短，平台象限停留时间延长，跨越虚拟平台次数增加，但差异无统计学意义(P＞0.05)。与低剂量组比较，西药组、高、中剂量组EL缩短，平台象限停留时间延长，跨越虚拟平台的次数增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。2)电镜结果:电镜观察海马神经元细胞:模型组可见大量空泡，细胞核形态不规则，核膜结构不清，甚者核碎裂，细胞器明显减少，线粒体明显水肿，线粒体嵴双层膜结构不清，甚者固缩坏死;西药组、高、中剂量组细胞核形态规则，核呈圆形，细胞器较丰富，线粒体、内质网轻微水肿，线粒体嵴可见，可见少量溶酶体;低剂量组神经元细胞结构有所改善，但仍可见细胞核固缩碎裂，细胞器减少，线粒体、内质网水肿。电镜观察皮层额叶神经元细胞:模型组细胞核形态不规则，甚者碎裂，细胞器明显减少，线粒体固缩，嵴的双层膜结构消失;西药组、高、中剂量组细胞核圆形，核膜清晰，细胞器较丰富，线粒体、内质网略显水肿，溶酶体明显。低剂量组与模型组比较有所改善，但仍见细胞核固缩，细胞器减少，线粒体、内质网水肿。海马及皮层均未见自噬小体结构。3）LC3蛋白检测:与假手术组比较，模型组及各药物干预组LC3蛋白表达水平均升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组比较，各药物干预组LC3蛋白表达水平升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。与西药组比较，高剂量组LC3蛋白表达明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05);中剂量组LC3蛋白表达虽有升高，但差异无统计学意义(P＞0.05)。与低剂量组比较，高、中剂量组LC3蛋白表达升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。4) Beclin-1蛋白检测:与假手术组比较，模型组及各药物干预组Beclin-1蛋白平均光密度（Mean optical density，MOD）值均升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组比较，西药组、高、中剂量组Beclin-1蛋白MOD值明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05);低剂量组Beclin-1蛋白MOD值虽有所升高，但差异无统计学意义(P＞0.05)。与西药组比较，高剂量组Beclin-1蛋白MOD值升高，差异无统计学意义(P＞0.05)。与低剂量组比较，西药组、高、中剂量组Beclin-1蛋白MOD值均升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。5)海马神经元AI检测:与假手术组比较，模型组及各药物干预组AI均升高，差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较，西药组、高、中剂量组AI均降低，差异有统计学意义(P＜0.05);低剂量组AI有所降低，但差异无统计学意义(P＞0.05)。与西药组比较，高剂量组AI降低，但差异无统计学意义(P＞0.05)。与低剂量组比较，西药组、高、中剂量组AI均降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。6)血液流变学指标检测:与假手术组比较，模型组及各药物治疗干预组全血粘度、血浆粘度升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组比较，各药物干预组全血粘度、血浆粘度降低，差异有统计学意义(P＜0.05);与西药组比较，高、中剂量组全血粘度、血浆粘度降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，低剂量组升高，但差异无统计学意义(P＜0.05);与低剂量组比较，高、中剂量组全血粘度、血浆粘度降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。
结论:1)VD的发病过程存在自噬激活，自噬能够抑制神经元细胞凋亡。2）祛风通窍方能有效改善VD大鼠学习、记忆功能。3）祛风通窍方能够上调自噬相关蛋白LC3及Beclin-1的表达水平，有效改善细胞凋亡及血液流变学情况。4)祛风通窍方对VD的保护作用存在一定量效关系。