M2PEP多肽诱导下巨噬细胞力学响应的研究

来源 :中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院) | 被引量 : 0次 | 上传用户:aqqz2000
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巨噬细胞是免疫系统中重要的成员,可以对生物体起保护作用。但对于肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)而言,常驻于肿瘤细胞中或是游离在肿瘤周围的巨噬细胞,被称为肿瘤相关巨噬细胞(Tumour-associated macrophages,TAMs),会促进肿瘤血管生成,并通过浸润血液转移到别的部位。研究人员在噬菌体的多肽分子数据库中发现一种新型的多肽导向分子——M2PEP,具有靶向TAMs的特点。当前大多数研究着重于多肽分子对于巨噬细胞的化学影响,而该多肽对细胞物理性质、特别是力学特性的改变,研究还不多。因此本文的主要目的是探索M2PEP对巨噬细胞的力学响应的影响,同时结合M2PEP本身的化学性质、细胞的生理反应和极化趋势进行研究。在过去三十余年,原子力显微镜(AFM,Atomic Force Microscope)的发展为细胞力学性质的测量提供了强有力的手段。本文将采用原子力显微镜作为主要研究工具,通过定制合成M2PEP,以鼠源264.7RAW巨噬细胞为研究对象。着重研究M2PEP共培育后的巨噬细胞形貌以及力学特性的改变,并结合M2PEP细胞毒力检测,流式细胞术极化趋势检测和共聚焦显微镜共培育过程的观察等传统生物学研究方法,从多角度分析M2PEP对于巨噬细胞的影响。研究发现,M2PEP作为一种新型的导向分子,对巨噬细胞具有低毒性,同时也有一定的诱导极化趋势。而通过原子力显微镜的测试,发现在低浓度(<IC50)时巨噬细胞整体杨氏模量减少了50%,在125μM和250μM浓度的情况下,杨氏模量会有所回升,但细胞粘附力则呈现下降。结合共聚焦观察,发现M2PEP与巨噬细胞共培育一段时间后,对细胞器内部生理环境也产生了一定的影响。这可能是M2PEP影响巨噬细胞力学特性的一种解释。
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