【摘 要】
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目的研究pEGFP-bFGF基因转染体外培养的人角膜缘干细胞及转染后对NaOH损伤的抵抗作用,探讨从基因水平上治疗眼表疾病的可行性,为基因工程技术和干细胞移植结合治疗眼表疾病提
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目的研究pEGFP-bFGF基因转染体外培养的人角膜缘干细胞及转染后对NaOH损伤的抵抗作用,探讨从基因水平上治疗眼表疾病的可行性,为基因工程技术和干细胞移植结合治疗眼表疾病提供初步的实验依据。本研究分为三部分:实验一:人角膜缘干细胞的体外培养及鉴定实验二:pEGFP-bFGF基因转染人角膜缘干细胞及其表达的观察实验三:转染后的人角膜缘干细胞对NaOH损伤的抵抗作用方法实验一:无菌条件下取新鲜尸眼眼球,剖取浅层角膜缘上皮组织,按组织块培养法进行细胞的原代及传代培养,倒置显微镜下观察不同阶段培养的细胞的形态,HE染色光镜下观察细胞,MTT法测定细胞生长曲线。制备HLSCs细胞爬片,用AE5作阴性标志检测角质蛋白K3/K12的表达以鉴定HLSCs,制备传代细胞爬片作阳性对照。实验二:借助真核表达载体( pEGFP-C1 ),采用脂质体(Lipofectamine 2000)转染法,将bFGF基因转染体外培养的HLSCs,
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多年冻土是世界上最为复杂的地基类型之一,其工程稳定性直接或间接受到地层含冰量、地温、岩性、水文条件以及大气温度,微地形地貌、周边植被环境等诸多因素的影响.在二十世
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