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随着社会的进步，人们的生活水平提高了，对肉蛋等动物性食品的需求量也大大增加，因此现代的养殖业发展非常迅速，但在发展的同时，有一个问题不得不引起人们的重视，那就是一些药物的使用问题。一些经营者在经济利益驱使下，在养殖业中大量使用四环素、沙丁胺醇、特布他林等药物用于治疗畜禽疾病或作为促生长剂。这些药物的大量使用不可避免使其残留于动物的肌肉、蛋、奶、脏器、组织中，进而通过食物链影响人体健康，因此食品安全问题已引起全世界的高度重视。为了保障消费者的生命安全，越来越多的国家已建立了一些药物残留的检测方法。传统的分析方法包括HPLC、LC-MS、GC-MS等仪器法。这些方法准确、稳定、可靠，可以作为标准方法，但仪器设备昂贵，样品前处理复杂，费时，费力，不易普及，因此必须建立快速、灵敏、有效的检测方法。酶联免疫检测法（ELISA）克服了以上方法的缺点，是一种快速、灵敏、方便、易普及的检测方法，有着广阔的发展前景。因此，本论文旨在建立四环素、沙丁胺醇和特布他林的酶联免疫检测法（ELISA）。对于四环素的研究，以O-tolidine法、对氨基苯甲酸（ABA）法、CDI法合成了四环素的三种免疫原TC-Tolidine-BSA、TC-ABA-cBSA、TC-CDI-cBSA，用所制备的三种免疫原免疫新西兰白兔获得了抗四环素抗体。每一种抗体都用三种包被抗原TC-Tolidine-OVA、TC-ABA-OVA、TC-CDI-OVA进行正交试验，据此得到最佳的抗体-包被抗原的组合为TC-CDI-cBSA免疫得到的抗体和TC-ABA-OVA作为包被抗原。根据这个组合得到的四环素抗体的IC50是3.92μg／mL，检测限为0.01μg／mL，线性范围为0.1-100μg／mL。该抗体对金霉素和土霉素的交叉反应率分别为112％和小于2％。四环素在牛奶中的添加回收率在74-116％之间，批内变异系数低于15％，批间变异系数低于25％。对沙丁胺醇，本研究用对氨基苯甲酸（ABA）法和CDI法合成了沙丁胺醇的两种免疫原SAL-ABA-cBSA、SAL-CDI-cBSA，用所制备的免疫原免疫新西兰白兔获得了两种抗沙丁胺醇抗体。用SAL-CDI-cBSA所获得的抗血清用异型包被抗原SAL-BDE-OVA检测时，沙丁胺醇抗体的IC50是9.86 ng／mL，检测限（LOD）是0.8 ng／mL，线性范围为2.6-50 ng／mL；用SAL-ABA-cBSA所获得的抗血清用异型包被抗原CL-OVA检测时，抗体表现了较好的特异性，沙丁胺醇抗体的IC50为8.97 ng／mL，检测限（LOD）是0.1 ng／mL，线性范围为0.8-1000 ng／mL。该抗体对盐酸克伦特罗（107％）和硫酸特布他林（10％）表现了很大的交叉反应率，但对盐酸莱克多巴胺和肾上腺素几乎无交叉，用该抗体进行沙丁胺醇在猪肝中的添加回收率实验，测得回收率在70-99％之间，批内变异系数13.3-3.5％，批间变异系数14.3-5.5％。对于特布他林，本论文以对氨基苯甲酸（ABA）法和BDE方法合成了特布他林的两种免疫原TER-ABA-cBSA和TER-BDE-cBSA，用所制备的两种免疫原免疫新西兰白兔获得了两种抗特布他林的抗体。用TER-ABA-cBSA所获得的抗血清用异型包被抗原TER-BDE-OVA检测时，抗体表现了较好的特异性，特布他林抗体的IC50为21.4 ng／mL，检测限（LOD）是1 ng／mL，线性范围为4-200 ng／mL；用TER-BDE-cBSA所获得的抗血清用异型包被抗原TER-ABA-OVA检测时，抗体表现了较好的特异性，特布他林抗体的IC50为9.25 ng／mL，检测限（LOD）是0.3 ng／mL，线性范围为0.8-100 ng／mL，该抗体对盐酸克伦特罗（93.9％）和沙丁胺醇（94.9％）表现了很大的交叉反应率，但对盐酸莱克多巴胺和肾上腺素几乎无交叉，用该抗体进行特布他林在猪尿中的添加回收率实验，测得回收率在80-99％之间，批内变异系数12.5-2.2％，批间变异系数12.2-5.2％。通过本课题的研究，我们成功地制备了四环素、沙丁胺醇、特布他林的完全免疫原，并通过动物免疫制备了相应的多克隆抗体。利用这些抗体，本研究建立了快速灵敏的检测这些药物残留的酶联免疫竞争法，为最终开发商品化的酶联免疫试剂盒打下了良好的基础。