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本研究以断奶仔猪为试验对象,首先探究了正常饲养条件下,饲粮添加不同水平谷胱甘肽(glutathione,GSH)对断奶仔猪生长性能、抗氧化能力和肠道屏障的影响,在此基础上进一步研究了GSH保护仔猪缓解diquat诱导氧化应激的效应及可能机制。试验一饲粮添加不同水平谷胱甘肽对断奶仔猪生长性能、抗氧化能力及肠道屏障的影响本试验旨在探究饲粮添加不同水平GSH对断奶仔猪生长性能、抗氧化能力及肠道屏障的影响。采用单因素设计,选取180头26±1 d平均体重相近(7.31±0.14)kg的“杜×长×大”(Duroc×Landrace×Yorkshire,DLY)断奶仔猪,按体重相近、公母各半的原则分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复6头猪。GSH的添加量分别为0(对照组)、20、35、50和65 mg/kg饲粮。试验期共35 d。试验结果表明:(1)与对照组相比,添加不同水平GSH对仔猪各阶段生长性能均无显著影响(P>0.05)。(2)试验第15 d仔猪血清8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHd G)和第36 d蛋白质羰基(protein carbonyl,PCO)含量随饲粮GSH的添加而降低(Linear,P<0.05),且不同水平GSH均能显著降低8-OHd G含量(P<0.05);试验第15 d仔猪血清谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)、第36 d总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)活性和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)随饲粮GSH的添加而增加(Linear,P<0.05),35、50和65 mg/kg GSH能显著提高T-SOD活性(P<0.05),50 mg/kg GSH有提高T-AOC的趋势(P=0.09)。(3)肝脏过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和GSH水平随饲粮GSH的添加而增加(Linear,P<0.05),丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量变化则相反(Linear,P<0.05);50 mg/kg GSH显著提高了肝脏CAT活性(P<0.05);65 mg/kg GSH显著提高了肝脏CAT活性(P<0.05),有提高GSH含量(P=0.09)和降低MDA含量的趋势(P=0.09)。(4)添加不同水平GSH对仔猪血清免疫球蛋白、补体蛋白及细胞因子的含量均无显著影响(P>0.05)。(5)随饲粮GSH的添加仔猪空肠GSH、T-AOC和CAT水平也随之增加(Linear,P<0.05),MDA含量随之降低(Linear,P<0.05),50 mg/kg GSH能显著提高空肠T-AOC(P<0.05),有增加GSH(P=0.08)及降低MDA(P=0.09)含量的趋势;不同剂量GSH均有提高仔猪空肠CAT活性的趋势(P=0.07)。(6)仔猪空肠Occludin和Claudin-1基因的相对表达量随饲粮GSH的增加呈先增加后降低的趋势(Quadratic,P<0.05),20和35 mg/kg GSH能显著提高仔猪空肠Occludin基因的表达(P<0.05),35和50 mg/kg GSH能显著提高Claudin-1基因的表达(P<0.05)。本试验结果表明,饲粮添加不同水平GSH对断奶仔猪生长性能和免疫功能无显著影响,能通过提高仔猪血清、肝脏及空肠抗氧化酶活性,降低氧化损伤产物含量,进而增强肠道屏障功能。试验二谷胱甘肽对diquat诱导仔猪氧化应激缓解作用研究本试验旨在研究饲粮添加GSH对diquat攻毒仔猪的保护效应及可能机制。选取24头26±1 d平均体重接近(6.51±0.08)kg的DLY断奶仔猪,按体重相近、公母各半的原则,随机分为4个处理,正对照组(基础饲粮+生理盐水)、负对照组(基础饲粮+diquat)、50 mg/kg GSH组(基础饲粮+50 mg/kg GSH+diquat)、100 mg/kg GSH组(基础饲粮+100 mg/kg GSH+diquat),每个处理6个重复,每个重复1头猪。所有仔猪按相应处理组饲粮正常饲养14 d后,负对照组、50和100 mg/kg GSH组仔猪按体重标准(10 mg/kg)腹腔注射diquat稀释液(10 mg/m L),正对照组注射相同剂量的灭菌生理盐水。攻毒后继续饲喂4 d,试验期共18 d。试验结果表明:(1)正常饲养条件下,GSH对仔猪生长性能无显著影响(P>0.05);50和100mg/kg GSH均能显著降低仔猪血清MDA、8-OHd G、PCO含量和二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性(P<0.05),100 mg/kg GSH有增加血清GPX(P=0.09)和T-SOD(P=0.08)活性的趋势。(2)与正对照组相比,diquat攻毒显著降低了仔猪末重、平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)和平均日增重(average daily gain,ADG)(P<0.05);与负对照组相比,50和100 mg/kg GSH均能显著缓解仔猪ADFI的降低(P<0.05),100mg/kg GSH可显著缓解仔猪ADG的下降(P<0.05)。(3)与正对照组相比,diquat攻毒显著降低了仔猪血清T-AOC和T-SOD水平(P<0.05)和空肠粘膜GSH、GPX和T-SOD水平(P<0.05),显著增加了血清和空肠粘膜MDA和8-OHd G含量(P<0.05);与负对照组相比,50和100 mg/kg GSH均能显著增加仔猪血清GSH、T-SOD水平(P<0.05)和空肠粘膜GSH和GPX水平(P<0.05),显著降低血清8-OHd G含量(P<0.05),100 mg/kg GSH能显著增加血清T-AOC(P<0.05),显著降低空肠粘膜8-OHd G含量(P<0.05)。(4)与正对照组相比,diquat攻毒显著增加了仔猪血清D-乳酸(D-lactic acid,DLA)和DAO水平(P<0.05)及空肠IL-6基因的表达(P<0.05),显著降低了空肠ZO-1、Occludin和Claudin-1基因的表达(P<0.05);与负对照组相比,50和100mg/kg GSH均能显著降低仔猪血清DAO活性(P<0.05),显著增加ZO-1基因的表达(P<0.05),50 mg/kg GSH能显著增加Claudin-1基因的表达(P<0.05),100mg/kg GSH能显著降低DLA水平(P<0.05)。(5)与正对照组相比,diquat攻毒显著增加了仔猪空肠Nrf2、GCLC和GPX1基因的表达(P<0.05),显著降低了Keap1基因的表达(P<0.05),有降低MRP1基因表达的趋势(P=0.06);与负对照组相比,50和100 mg/kg GSH均能显著增加空肠Keap1基因的表达(P<0.05),100 mg/kg GSH能显著降低GCLC基因的表达(P<0.05)。(6)与正对照组相比,diquat攻毒显著降低了仔猪空肠PGC-1α、SIRT-1、ATPS和Cyt c基因的表达(P<0.05);与负对照组相比,50和100 mg/kg GSH均能显著增加TFAM基因的表达(P<0.05),50 mg/kg GSH能显著增加PGC-1α基因的表达(P<0.05),100 mg/kg GSH能显著增加Cyt c基因的表达(P<0.05)。本试验结果表明,diquat攻毒显著降低了仔猪生长性能、抗氧化能力,破坏肠道屏障;饲粮添加GSH能增强机体抗氧化能力,缓解线粒体氧化损伤,维护仔猪肠道健康,从而缓解diquat诱导的仔猪生长抑制。其中,100 mg/kg GSH对氧化应激仔猪有更好的保护作用。综上所述,本研究结果表明,GSH能显著提高仔猪的抗氧化能力,改善肠道屏障结构和功能。在氧化应激条件下,GSH能有效缓解diquat诱导的仔猪氧化损伤,缓解氧化应激导致的仔猪生长抑制。