化学键合毛细管电泳涂层柱的制备与应用

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涂层柱的制备技术一直是毛细管电泳技术中的一个重要部分。出于调整电渗流和防止生物大分子在毛细管上吸附的需要,各种类型的涂层毛细管柱已经在毛细管电泳中体现了越来越重要的作用。化学键合型的涂层柱具有稳定性好,操作条件灵活等特点,应用范围越来越广。但是目前键合型涂层柱的制柱方法普遍存在步骤繁琐、制备成功率低、成本高等缺点,有必要开发出一种快速简便成功率高的制柱方法。本论文合成了活性三甲氧基硅烷修饰的聚乙烯亚胺衍生物,并用简单的方法把此高分子聚合物键合于石英毛细管内壁上,从而成功地制备了聚乙烯亚胺涂层毛细管柱。该方法以γ-缩水甘油醚丙基三甲氧基硅烷与聚乙烯亚胺反应,所得的高分子聚合物在热处理的条件下与毛细管内壁上的硅醇基反应而形成了共价结合的涂层。为了便于与传统的键合型涂层毛细管柱比较,本论文还通过两步柱内反应制备了化学键合型的环氧化合物涂层柱,并分别对上述两种涂层毛细管进行了表征和柱性能比较,考察了它们的应用领域。实验结果显示,所制得的聚乙烯亚胺涂层柱性能稳定、能有效抑制电渗流和防止碱性蛋白质在柱上的吸附。分析结果呈现出良好的重现性。与传统方法制备的环氧涂层柱相似,聚乙烯亚胺涂层柱也能够有效地分离碱性和酸性蛋白质。同时,在低电渗流的条件下可实现无机和有机阴离子的分离。在酶分析、碱性小肽分离和手性拆分方面,涂层柱均显示了良好的分离效果。本论文所研究的涂层毛细管制备方法结合了物理吸附涂层和化学键合涂层制柱方法的诸多特点,只需要通过一步柱内反应便可以形成化学键合型的聚乙烯亚胺涂层毛细管。本论文的研究结果进一步证明,这种方法是一种简单、高效、低成本、重现性好并且能广泛应用的涂层技术。
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