论文部分内容阅读
目的:研究孕酮对吸入麻醉药七氟醚诱导的新生大鼠中枢神经系统损伤是否具有保护作用,并探讨孕酮受体在其中是否发挥作用及相关机制。方法:取160只新生Sprague-Dawley大鼠,称重后随机分为四组:对照组(C组),七氟醚组(S组)和孕酮+七氟醚组(S+P组)和孕酮+七氟醚组+孕酮受体阻断剂醋酸乌利司他组(S+P+U组),每组40只,组内新生大鼠雌雄各半。S组从大鼠出生第7d到第9d进行连续3天七氟醚暴露(七氟醚浓度3%,每天2h),制备新生大鼠七氟醚中枢神经损伤模型;药物干预组从出生第4d到第9d每天进行颈部皮下注射孕酮(8mg/kg)或孕酮加醋酸乌利司他(3mg/kg),出生第7d到第9d进行连续3天七氟醚暴露(七氟醚浓度3%,每天2h)。之后采用TUNEL染色法来评价新生大鼠海马神经细胞凋亡情况,采用免疫蛋白印记法测定海马组织中凋亡蛋白(caspase-3)的蛋白表达。采用Y迷宫、Morris水迷宫和跳台实验三种行为学方法来评价每组大鼠在出生后第6周时的空间认知能力。结果:1、分子生物学实验结果显示:与对照组相比,七氟醚处理可使新生大鼠中枢神经系统中海马神经细胞凋亡增加,海马组织中caspase-3的蛋白表达增加(P<0.01),可使其发育晚期海马神经细胞出现不可逆的损害;与七氟醚组相比,孕酮可以明显减少七氟醚导致的神经细胞凋亡,降低海马组织中caspase-3的蛋白表达(P<0.01),可以部分逆转其发育晚期神经细胞的形态改变;与孕酮组相比,醋酸乌利司他组海马神经细胞凋亡明显增加,海马组织中caspase-3的蛋白表达也有增加(P<0.05),其发育晚期的神经细胞也出现恶化。2、Y迷宫实验结果显示:与对照组相比,七氟醚降低了大鼠的交替得分率(P<0.05);与七氟醚组相比,应用孕酮预处理可以提高七氟醚麻醉后大鼠的交替得分率(P<0.05);与孕酮组相比,应用孕酮受体阻断剂可以拮抗孕酮的作用,使大鼠的交替得分率降低(P<0.05)。水迷宫实验结果显示:与对照相比,七氟醚延长了大鼠在水迷宫中找到平台所需时间(P<0.05),减少了大鼠在目标象限的停留时间(P<0.05);与七氟醚组相比,应用孕酮预处理可以缩短七氟醚麻醉后大鼠在水迷宫中找到平台所需时间(P<0.05),增加在目标象限的停留时间(P<0.05);与孕酮组相比,应用孕酮受体阻断剂可以拮抗孕酮的作用,使大鼠在水迷宫中找到平台所需时间延长(P<0.05),在目标象限的停留时间减少(P<0.05)。跳台实验结果显示:与对照组相比,七氟醚明显缩短了大鼠的跳台潜伏期(P<0.01),增加了在跳台中的错误次数(P<0.01);与七氟醚组相比,应用孕酮预处理可以明显延长大鼠的跳台潜伏期(P<0.05),减少在跳台中的错误次数(P<0.01);与孕酮组相比,应用孕酮受体阻断剂可以拮抗孕酮的作用,使大鼠的跳台潜伏期缩短(P<0.05),错误次数增加(P<0.05)。结论:1、新生大鼠多次重复吸入七氟醚(浓度3%,每天2h,连续三天)可造成神经损伤并导致其发育晚期的神经认知功能损害。2、孕酮对七氟醚所致的发育期神经损伤具有神经保护作用,且这种保护作用可能由孕酮受体介导。