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研究目的: 本课题先采用高脂饮食制作代谢综合征模型来观察糖尿病前期征兆,来观察高脂饮食对葡萄糖水平、氧化应激及N-聚糖的影响;再采用高脂饮食联合小剂量腹腔注射STZ来制备2型糖尿病动物模型,进一步观察糖尿病时大鼠的葡萄糖水平、氧化应激、N-聚糖及糖脂蛋白代谢情况。然后通过对正常对照组、模型组、治疗组来分别观察补气活血药对高脂饮食引起的葡萄糖水平、氧化应激及N-聚糖变化的作用及补中益气汤对2型糖尿病大鼠葡萄糖水平、氧化应激、N-聚糖及糖脂蛋白代谢的改善作用。 研究方法: ⑴模型一 将雄性SD大鼠随机分为正常对照组,喂饲普通饲料;模型组,喂饲高脂饲料;补气活血1组(RSA1),2:1补气活血中药灌胃;补气活血2组(RSA2),1:2补气活血中药灌胃。采用分光光度法测定粪便NO代谢产物NO3-、ONOO-,脂质过氧化物MDA,GLU及AMY活性;通过凝集素(PSA、PNA)亲和沉淀法测定AMY凝集素结合率,分析AMY N-聚糖特点,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法分析AMY酶谱,并作统计学分析。 ⑵模型二 ①从61只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组;剩下的SD大鼠用于造模,将造模成功的大鼠(72小时后空腹血糖值>16.7mmol/L)随机分为模型组10只、治疗Ⅰ组10只、治疗Ⅱ组10只。正常对照组给予普通饲料喂养,模型组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组给予高脂饲料喂养;治疗Ⅰ组大鼠灌服补中益气丸水溶液,治疗Ⅱ组灌服经盐酸处理的补中益气丸水溶液,模型组与正常对照组组灌服生理盐水作为对照。 ②采用分光光度法测定大鼠尿丙酮酸、乳酸、游离脂肪酸、尿素氮、尿NO代谢产物NO3-、ONOO-,脂质过氧化物MDA,GLU及AMY活性;通过凝集素(PSA、PNA)亲和沉淀法测定AMY凝集素结合率,并检测α-man活性,分析N-聚糖特点,并作统计学分析。 研究成果: ⑴模型一 模型组大鼠逐渐出现多饮、多食、多尿,体重下降等症状。补气活血法治疗后,症状有所改善,NO3-水平和AMY活性均显著升高,分别以RSA1、RSA2作用更明显,此外,RSA1仅升高S-Amy,而RSA2升高S-Amy和P-Amy;补气活血法治疗后,粪便GLU浓度明显降低,AMY PSA、PNA结合率、MDA、ONOO?有降低趋势,仅RSA2明显降低肠道ONOO-浓度。 ⑵模型二 模型组大鼠逐渐出现多饮、多食、多尿,体重下降等症状。补中益气汤治疗后,症状有所改善,NO3-水平和AMY活性、α-man活性、AMY PSA、PNA结合率均显著升高;尿丙酮酸、尿乳酸、尿脂肪酸、尿素氮、MDA、GLU、ONOO-均有降低趋势。 研究结论: ⑴模型一 补气活血法能改善高脂饮食大鼠肠道AMY、N-糖链缺陷,升高AMY活性及NO3-水平,同时降低肠道GLU、MDA及ONOO-浓度,因而可能调节消化吸收及葡萄糖代谢,抑制自由基对肠道的损伤。不同比例补气活血中药,其作用效果有一定差异。 ⑵模型二 补中益气汤可以改善2型糖尿病大鼠多饮、多食、多尿,体重下降等症状,对糖尿病大鼠的糖脂蛋白代谢紊乱、氧化应激及N-糖基化异常均有明显改善作用。补中益气汤对糖尿病大鼠的糖脂蛋白代谢紊乱、氧化应激及N-糖基化异常的改善可能主要通过改善脾胃的运化升清功能来实现的,即西医的改善胰岛素抵抗综合征。