背景:脊髓损伤(Spinal Cord Injury，SCI)是脊柱疾病和脊柱损伤的严重并发症，中医药所具备的多因素、多靶点作用的优点，正逐步成为促进SCI后神经再生的研究热点。中药复方“脊髓康”是基于SCI“肾督虚损，瘀阻督脉，枢机统率失职”病机特点，在“温肾通督”理论指导下组方而成的临床验方，大量前期研究已证实其促进SCI修复作用确切，然而其具体干预机制尚不明确。　　目的:体外构建大鼠脊髓神经元凋亡模型，观察“脊髓康”含药血清对损伤神经元的存活及凋亡的影响，探讨“脊髓康”抗脊髓损伤的可能作用机制。　　方法:体外分离培养鉴定大鼠脊髓神经元;制备谷氨酸诱导凋亡模型;以不同剂量中药复方“脊髓康”及强的松含药血清配制的完全培养基干预神经元损伤模型，通过形态学观察、CCK-8法、TUNEL法观察神经元的存活与凋亡，Western blot、qRT-PCR等分子生物学方法检测凋亡指标bcl-2、bax及Caspase3的表达。　　结果:(1)神经元存活情况:体外培养的脊髓神经元诱导凋亡后，大部分突触断裂回缩，部分胞核固缩、胞质出现空泡、胞体崩解;加入强的松及不同浓度的脊髓康含药血清培48h后，神经元坏死的速率呈现不同程度地减慢。其中强的松组细胞存活最多，轮廓清晰完整，再生突触交织成网，实验1组细胞坏死崩解较多，存活细胞轮廓模糊、再生突触稀疏，实验2、3组细胞存活较多，以实验3组细胞轮廓更清晰，折光强，存活细胞明显聚集生长。CCK-8结果显示，各组间细胞存活不全相同（P＜0.01），除实验2组外，其余各组均高于模型组(P＜0.01)，三组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。　　(2)神经元的凋亡情况:神经元损伤后加入含药血清继续培养48h，模型组可见大量凋亡神经元，仅少量存活，形态不规则;强的松组存活神经元较多，少量细胞凋亡;脊髓康低剂量组大量神经元呈核质深染，胞体轮廓不清;中剂量组较多神经元凋亡，存活神经元排列紊乱，轮廓尚可见;高剂量组可见部分凋亡细胞，存活细胞突触明显，部分交织成网状。高剂量组凋亡率低于阳性对照组和中剂量组，与模型组比较有统计学意义(P＜0.05);低剂量组与模型组比较无统计学差异(P＞0.05)。　　(3) Western blot结果显示:各组神经元bcl-2、bax、Caspase3蛋白相对表达水平不全相同，表达高低依次为:bcl-2:高剂量组＞强的松组＞中剂量组＞低剂量组＞模型组（P＜0.01）;bax:模型组＞低剂量组＞中剂量组＞高剂量组＞强的松组(P＜0.01)。bcl-2/bax比值:强的松组＞高剂量组＞中剂量组＞低剂量组＞模型组(P＜0.01)。Caspase3:模型组＞低剂量组＞中剂量组＞强的松组＞高剂量组（P＜0.001）。　　(4)荧光定量PCR结果与蛋白表达结果基本一致，各组mRNA表达高低依次为:bcl-2:强的松组＞高剂量组＞中剂量组＞低剂量组(P＜0.01);bax:低剂量组＞中剂量组＞高剂量组＞强的松组(P＜0.01)。bcl-2/bax:强的松组明显上调这一比例，脊髓康低、高剂量组高于中剂量组，但脊髓康低剂量组与高剂量组间比较无统计学差异(P=0.825＞0.05)。Caspase3:强的松组和脊髓康高剂量组明显低于脊髓康低、中剂量组(P＜0.01)，而强的松组与脊髓康高剂量组间、脊髓康低、中剂量组间比较均无统计学(P＞0.05)。　　结论:(1)100μM的Glu在一定程度上模拟了SCI后体内神经元生存的微坏境，能够引起体外培养的脊髓神经元的凋亡，可用于制备SCI的细胞模型。　　(2)强的松及脊髓康中、高剂量血清均有利于损伤后神经元存活，存活细胞数量三组间比较差异无统计学意义，降低凋亡率方面脊髓康高剂量组优于其他干预组。　　(3)强的松以及脊髓康3个剂量均能够提高神经元bcl-2蛋白及mRNA的表达、抑制bax、Caspase3蛋白及mRNA的表达，并上调bcl-2/bax的比值;脊髓康3个剂量中高剂量作用更明显，在上调bcl-2蛋白、抑制Caspase3蛋白表达略优于强的松组，其余指标均劣于强的松组但优于低中剂量组。结合神经元的存活率和凋亡率分析，推测脊髓康含药血清可能通过其他途径影响神经元的存活，或通过干预胶质细胞等间接影响神经元的凋亡或存活。