疏花蛇菰抗非小细胞肺腺癌A549细胞作用的物质基础及应用

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非小细胞肺癌(non–small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌总人数的80%,肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)约占NSCLC的50%,死亡率高,现有药物副作用多,筛选安全有效的治疗LUAD的药物仍具重要意义。疏花蛇菰是蛇菰科植物疏花蛇菰Balanophora laxiflora Hemsl.的干燥全株。本论文对疏花蛇菰的提取方法、有效成分分离纯化、结构确证、配方颗粒的制备、疏花蛇菰药材、配方颗粒及标准品标准的质量标准草案、体外抑制A549细胞增殖作用实验等进行研究,结果如下:1.筛选了疏花蛇菰最佳提取方法筛选出了疏花蛇菰的最佳提取条件为加8倍量的95%乙醇,90℃回流提取90min。2.完成了疏花蛇菰有效成分分离纯化采用溶剂萃取方法,确定了活性部位为乙酸乙酯相及石油醚相。筛选出了硅胶柱层析及结合HPLC制备分离蛇菰活性成分的最佳条件,得到5个有活性的单体化合物。3.确证了疏花蛇菰有效成分的结构5个活性单体化合物经波谱综合解析,分别确证为蛇菰素A(balanophorin A)、蛇菰素B(balanophorin B)、β-香树脂醇(β-amyrin)、羽扇豆醇(lupeol)及没食子酸(gallic acid)。4.优选出了疏花蛇菰配方颗粒制备条件疏花蛇菰配方颗粒的最佳制备条件为取疏花蛇菰,加18倍量的水,浸泡30min,煎煮45min,煎煮3次,过滤,浓缩,干燥,按浸膏粉与混合辅料(药材细粉:可溶性淀粉(1:1))2:1比例混合,加适量10%淀粉浆制备软材,挤压制粒,干燥,整粒得。5.建立了疏花蛇菰药材、配方颗粒、标准品质量标准草案在9批疏花蛇菰药材性状鉴别、TLC薄层鉴别,水分、总灰分检查,醇浸出物及含量测定等研究的基础上,建立了疏花蛇菰药材质量标准草案。在3批疏花蛇菰配方颗粒性状描述,薄层鉴别,水分及粒度检查,含量测定等研究的基础上,建立了疏花蛇菰配方颗粒质量标准草案。在蛇菰素A和蛇菰素B的制备方法、性状、鉴别、纯度等研究的基础上,建立了定性用蛇菰素A、蛇菰素B的标准品质量标准草案。6.进行了疏花蛇菰配方颗粒体外抑制A549细胞增殖作用实验采用CCK-8法,疏花蛇菰配方颗粒40μg/m L、160μg/m L、640μg/m L对A549细胞的抑制率分别为9.75±1.33%、54.38±3.12%、96.71±0.72%,提示其对A549细胞增殖具有较好的抑制作用。
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