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马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata (Say)起源于美国西南和墨西哥,现扩散到北美洲、欧洲和亚洲的大部分国家,成为马铃薯上最重要的食叶害虫。在我国,马铃薯甲虫现分布于新疆维吾尔自治区北疆,包括乌鲁木齐市、奇台和吉木萨尔县和木垒哈萨克自治县。在新疆,马铃薯甲虫为害马铃薯和茄子。化学防治是新疆治理马铃薯甲虫的常用方法,而这可能引起抗药性。因此,评估马铃薯甲虫对新烟碱类药剂的敏感性差异,研究其分子机理,对综合治理十分必要。采用点滴法于2009和2010年监测了新疆维吾尔自治区北疆9个田间种群对新烟碱类杀虫剂吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪和噻虫啉的敏感性变化。发现田间种群对吡虫啉和噻虫嗪的敏感性逐年降低。2009年监测了6个田间种群,3种群对啶虫脒和噻虫嗪低抗;2010年监测的6个田间种群全部对噻虫嗪产生了抗性,中抗和低抗种群各3个。在监测的2个田间种群中,1个对啶虫脒低抗。噻虫嗪可能与三氟氯氰菊酯存在交互抗性。4龄幼虫对新烟碱类农药尚敏感,且与常规药剂没有交互抗性。测定了胡椒基丁醚(PBO)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)和磷酸三苯酯(TPP)对马铃薯甲虫成虫和4龄幼虫代谢新烟碱类农药的抑制作用,发现PBO、DEM和TPP在尼勒克、乌鲁木齐和奇台种群4龄幼虫中对吡虫啉的毒杀活性具有明显的增效作用。PBO、DEM和TPP在奇台和乌鲁木齐种群4龄幼虫中对噻虫嗪的毒杀活性均没有明显的增效作用。PBO在察布查尔成虫中对吡虫啉的毒杀活性有明显增效作用;DEM和TPP在奇台种群成虫中对噻虫嗪的毒杀活性具有明显的增效作用。以上结果表明多功能氧化酶、谷胱甘肽转移酶和酯酶均参与了马铃薯甲虫对新烟碱类的代谢,其作用大小随虫态及抗药性差异不同而不同。应用马铃薯甲虫P450转录组序列,进行克隆验证,共得到34条序列,鉴定出32个细胞色素基因。这为新烟碱类农药代谢机理的研究奠定了基础。应用PCR技术,克隆出烟碱型乙酰胆碱受体α亚基序列共9条,在NCBI网络数据库中通过blast比对,得出其分别属于nAchRa 3、4、5、7、9、10亚基。应用RACE技术对其中一条较长的nAchRa亚基进行了全长克隆,cDNA序列共1378bp,其开放阅读框从25—1368位点,长度1344 bp,编码448个氨基酸。该基因具有nAchRa亚基的典型结构相邻的两个半胱氨酸(Loop C环中),并根据该基因编码的氨基酸序列与其他昆虫的nAchRa亚基的相似性,命名为nAchRα10。