小麦成熟胚细胞培养技术创新

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小麦是世界性的粮食作物,稳步提升其产量和品质是应对各种潜在威胁的根本之策,以传统育种手段对小麦进行改良已发展至瓶颈阶段,应用生物技术对小麦进行改良是选育小麦新品种的有效途径。与其他外植体相比,成熟胚具有材料易保存、随时可进行培养的独特优势,能够满足遗传转化研究中的大量重复性工作,但目前的小麦成熟胚再生率很低,难以达到遗传转化的要求。因此,提高成熟胚再生能力,促进成熟胚在小麦遗传改良中的应用具有重要意义。本研究以优异育种亲本金禾9123为主要材料,探究外植体生理状态及取材方式对成熟胚培养效果的影响,探索一种新型的成熟胚处理方式,以此为基础,研究适合该方式的培养条件,建立完整的成熟胚再生体系,并以8个不同的品种为材料对所建立的再生体系进行检验。研究取得了以下主要结果:确定了成熟胚的最佳萌动方案及成熟胚不同部位所诱导愈伤组织的能力,与国内外被广泛应用的取材方式进行对比分析,结果表明,小麦种子以切胚法取材,诱导的愈伤组织质量最高,具有较强的分化能力,植株再生率达17.5%。在诱导愈伤组织阶段,Dicamba具有比2,4-D更好地诱导出高质量的愈伤组织的能力,并加快了植株再生进程,MS+4 mg?L-1Dicamba作为诱导培养基诱导愈伤组织,并用相同培养基两周继代一次,选用MS0培养基再生植株,植株再生率最高,达40.6%。在植株再生阶段,再生培养基中添加细胞分裂素(TDZ、6-BA)具有促进再生植株生长,提高植株再生率的效果。利用该技术体系,筛选出了冀5265、金禾13294、金禾9123等5个组培效果好的材料,为小麦遗传转化提供了材料平台。
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