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玉米是重要的粮食作物和饲料作物,建立农杆菌介导的优良玉米自交系的遗传转化体系,对玉米基因工程育种具有十分重要的意义。本研究以玉米骨干自交系幼胚为外植体建成了再生体系,并初步建立了根癌农杆菌介导Chi-linker-Glu基因的遗传转化体系,研究结果为今后玉米转基因技术、转基因育种提供了一定的基础。主要研究结果如下:1.幼胚是目前遗传转化中应用最多的外植体。本研究以4个玉米骨干自交系为材料,通过正交试验和单因子试验优化了玉米幼胚再生的培养基,并对其多种影响因素进行研究。结果表明,在N6B5基本培养基上诱导初级愈伤组织时,2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)起主导作用;诱导II型愈伤组织时,脯氨酸(L-pro)、天冬酰胺(L-Asn)及2,4-D有显著作用,L-pro作用更强些;而高浓度的水解酪蛋白(CH)有相反作用。继代次数为1次和2次,其绿苗分化率较高。添加10g/L甘露醇有利降低褐化率。1/2 MS培养基附加0.2mg/L激动素(KT)适合玉米分化苗生根。应用这个再生体系,4个自交系的幼胚均得到再生植株,频率为55.2~18.3%。这个体系的建立,为进一步建立以幼胚为受体系统的遗传转化体系提供了平台。2.以87-1、137、综3三个玉米骨干自交系的幼胚为材料,详细研究了影响农杆菌介导含有Chi-linker-Glu融合基因的植物表达载体转化玉米的各种因素,建立了骨干自交系的遗传转化体系。研究结果表明:在感染液和共培养基中都加入乙酰丁香酮(150μmol/L),能显著提高转化效率;合适的菌液浓度(OD600=0.6)、浸染时间(15 min)、共培养时间(60h)、较低共培养温度(22℃)、较酸的共培养基(pH 5.4)均有利于提高T-DNA转移效率。感染前将II型愈伤组织于附加60g/L甘露醇的培养基中高渗处理4h提高了转化率;延迟筛选有利于提高抗性愈伤组织的存活率和分化率。应用这个转化体系,获得了转基因植株。PCR检测表明,外源基因已经整合进玉米基因组中。这一体系的建立,为进一步将有用基因导入玉米优良自交系奠定了基础。