生长素信号调控拟南芥开花时间的功能和分子机理的研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bard
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花器官发生启动的时机对植物整个生命周期至关重要。植物的开花时间受到外在环境因子包括光周期和温度,以及内在因子包括植物激素的调控。到目前为止,对于植物激素对开花时间调控的研究主要集中在Gibberellins(GAs)上。GA主要在短日照(SDs)下促进开花,并通过调控花分生组织的特征基因LEAFY(LFY)以及开花时间整合基因SUPPRESSOR OF CONSTANS1(SOC1)的表达来实现。但对于生长素信号是否调控开花时间,目前尚不清楚。我们研究了生长素信号途径是否参与调控开花时间,并探讨了与GA在调控开花时间功能上的相互关系。首先,我们发现拟南芥显性突变体axr2-1[其结构域Ⅱ中的点突变(P87S)导致其蛋白稳定性增强,削弱了生长素信号]在SDs下晚开花。其次,通过对一系列ARF缺失突变体的开花表型分析,发现arf7-1 arf19-1突变体在SDs下晚开花;酵母双杂交实验表明AXR2/IAA7、IAA7点突变(P87S)蛋白axr2-1和ARF7、ARF19存在蛋白相互作用。我们通过在WT中过量表达吲哚乙酰赖氨酸酯合成酶基因iaaL(该基因来源于假丁香单胞杆菌,编码吲哚乙酸赖氨酸酯合成酶,它能够催化游离的生长素与赖氨酸形成一种复合物从而使生长素失去生理活性),结果表明:在SDs下过量表达iaaL蛋白的转基因植株的开花时间显著延迟。外源GA处理能够回复axr2-1、arf7-1 arf19-1、35Spro-iaaL-HA的晚开花表型。通过构建spy-1 axr2-1和spy-3 axr2-1双突变体,发现双突变体在SDs下的开花时间早于axr2-1突变体。进一步采用RT-PCR分析发现,GA生物合成途径关键酶基凼GA200x的表达量在axr2-1、arf7-1 arf19-1和35Spro-iaaL-HA中明显减少。采用RT-PCR,qRT-PCR技术检测到SOC1和LFY的表达在axr2-1中明显下调,经外源GA处理后SOC1和LFY的表达量与GA处理过的WT没有明显差别。此外,通过在axr2-1突变体背景分别过量表达SOC1和LFY,发现转基因植株在在SDs下的开花时间早于axr2-1突变体。这些结果表明Auxin-IAA7-ARF7/ARF19介导的生长素信号途径参与了SDs下的开花时间调控,这至少部分是通过调控GA生物合成途径关键酶基因GA20ox的转录水平,最终影响了SOC1和LFY的表达来完成对开花时间的调控。
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