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金钱鱼(Sarcophagus Argus)是一种广盐性的鱼类,主要栖息于沿岸及河口水域,经过淡化后可以在淡水中养殖。金钱鱼色彩漂亮,并且营养价值高,受到了广泛的喜爱。迄今,金钱鱼全人工育苗尚未解决,随着苗种市场需求的增加,天然捕捞的野生苗种难以满足大规模养殖的需求。因此,需要加大金钱鱼的生殖调控的基础理论研究和人工育苗的研究。本研究以金钱鱼为研究对象,展开以下研究:1.金钱鱼雄激素受体(AR)克隆与鉴定。利用SMART-RACE技术,从金钱鱼的精巢中克隆鉴定出金钱鱼雄激素受体的cDNA序列全长2425bp,其中5‘UTR 11bp,3’UTR 126bp;开放阅读框(ORF)2289bp,编码763个氨基酸残基,预测其蛋白分子量约为20.07 kDa。通过氨基酸序列比对分析,发现AR具有典型的核受体家族序列特征。系统进化树分析结果显示,金钱鱼AR序列与狼鲈的亲缘性最近。2.金钱鱼雄激素受体的时空表达。利用半定量PCR方法检测AR在金钱鱼不同组织中的表达,结果显示,AR在雄鱼的垂体和精巢组织中高表达,而在雌鱼的脑、垂体、卵巢和心脏组织中高水平表达。利用荧光定量PCR检测精巢发育早期、中期和晚期AR的表达,发现精巢发育中期性腺中AR表达量较高,显著高于发育前期和晚期。3.性类固醇激素对雄激素受体表达的影响。离体孵育卵巢24h后,检测雌二醇(浓度为1M)和甲基睾酮(浓度为1M)对AR及相关性类固醇激素生成关键因子表达影响的情况。结果表明,雌二醇能显著抑制AR的表达,同时刺激雌性相关基因P450a和Foxl2的表达。离体甲基睾酮孵育均能刺激AR的表达,同时抑制了雌性相关基因P450a和Foxl2。结果提示了金钱鱼卵巢对雄激素的敏感性及性腺发育的可塑性,表明雄激素通过刺激AR表达、抑制雌性发育调控关键基因表达而影响卵巢发育。研究结果为金钱鱼性逆转奠定理论基础,并为获得伪雄鱼亲本及全雌单性苗种培育提供了理论指导。