近年来,由于抗生素、皮质类固醇激素及免疫抑制剂的大量使用,临床上出现了一种抗生素治疗无效的顽固性乳房炎,我们选择80例患牛进行了病原真菌的分离鉴定,共从46头牛的54个乳区分离到酵母菌62株。其中白色念珠菌所占比例最大,为32.1%(20/62),其次为新型隐球菌(16.1%),克柔氏念珠菌(14.5%),皱落念珠菌(9.7%),热带念珠菌(8.1%),季也蒙念珠菌(6.5%),光滑念珠菌(6.5%),近平滑念珠菌(3.2%)和球拟酵母菌(3.2%)。 目前,动物真菌病的诊断大多仍采用传统的培养法,不仅敏感性较低,而且耗时较长,往往耽误最佳治疗时机。为寻找一种快速诊断奶牛酵母菌性乳房炎的方法,我们设计了酵母真菌的DNA通用引物,对20例酵母菌性乳房炎的奶样及9种酵母菌(白色念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、皱落念珠菌、近平滑念珠菌、新型隐球菌、球拟酵母菌)的肉汤纯培养液进行PCR扩增。结果表明,8种酵母菌均可被扩增,20例酵母菌性乳房炎奶样均出现阳性结果,扩增产物为260bp左右,检测工作仅耗时2.5h。同时,对照试验表明,该对引物不能扩增无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等7种常见的乳房炎致病细菌。敏感性试验结果表明,该方法最低可检测10个酵母菌,因此PCR方法检测奶牛酵母菌性乳腺炎是一种快速、敏感和特异的方法,可望在兽医临床推广应用。 基于中药药敏试验结果,本着中医辨证施治的原理,以调气活血、消肿散淤为原则,我们自拟了治疗乳房炎的纯中药方剂“乳肿消”,进行了体内外抑菌试验。结果表明该中药方剂的最低抑菌浓度较低,临床治疗试验表明,使用乳肿消一个疗程基本可使患牛临床症状消失,产奶量回升;乳成分对比分析发现,治疗前乳糖、乳脂肪显著降低,而乳蛋白、体细胞数极显著升高,治疗后这些指标基本恢复到正常范围内;奶牛血液流变学指标的测定表明,治疗前全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数和刚性系数均极显著高于健康牛(p<0.01),治疗后上述指标基本恢复正常。由此证明,该中药方剂能够降低患牛的血粘度,改善乳区血液