骨骼肌卫星细胞是骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间的具有增殖分化潜力的肌源性细胞。它们在一般情况下是处于静息状态的，当被激活后，具有增殖分化、融合成肌管、再形成肌细胞的能力。由于骨骼肌卫星细胞在骨骼肌生长发育以及再生中扮演着非常重要的地位，很多科学家已经开始研究它的生理特性，目前国内外猪骨骼肌卫星细胞的研究工作开展的还比较少；而肌细胞增强因子2(MEF2)属于MADS框转录因子家族，它们在肌肉发生过程中起着非常重要的调节作用，目前关于猪MEF2因子的研究还未见报道。 本研究中，我们建立并完善了猪骨骼肌卫星细胞的培养方法。采用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法获取新生猪骨骼肌卫星细胞，并进行体外原代和传代培养。观察细胞各个阶段的形态，通过生长曲线等手段研究骨骼肌卫星细胞的增殖与分化能力，利用RT-PCR以及免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定。结果显示两步消化法适用于骨骼肌卫星细胞的获取。在生长培养基作用下，细胞增殖旺盛；在分化培养基下，细胞分化良好，可融合成肌管。 通过比较基因组学的方法克隆了猪MEF2基因家族中的MEF2B和MEF2C基因以及猪CACNG1基因。获得了包括完整编码区的长度为1940bp的MEF2C基因和长度为1136bp的CACNG1基因的cDNA序列；通过RACE得到了猪MEF2B基因的5’非翻译区序列，将该序列与PCR扩增的产物拼接后得到了长度大约为1070bp的猪MEF2B基因cDNA序列。将猪MEF2C、MEF2B和CACNG1基因的序列提交到NCBI中GenBank中，登录号分别为DQ343149、DQ366898和DQ323981。 分析猪MEF2C和MEF2B基因的编码区序列发现，两个基因都含有MADS保守结构域，进一步将猪的MADS保守结构域和人及小鼠的结构域比对发现此顺式作用元件非常保守，表明MEF2因子在这3个物种肌肉发生过程中扮演同样重要的作用。比较猪MEF2C基因和人MEF2C基因的编码区序列，发现它们间的相似性为91％，同时发现猪MEF2C基因序列缺少了与人第8外显子以及第11外显子的部分序列相对应的序列，由于在人、鼠研究上证明MEF2家族存在多种剪接体，因此我们预测猪MEF2C基因也存在不同的剪接体。 RT-PCR分析了猪MEF2B和MEF2C基因在组织以及骨骼肌细胞体外分化过程中的表达情况。组织表达谱分析结果表明，两个基因除了在胃、小肠、胚胎等组织无法检测到外，其他组织都有大量的表达；而在骨骼肌细胞体外分化过程中的表达模式研究发现，随着分化的深入，两个基因的表达量越来越大；而在骨骼肌卫星细胞时期两个基因的表达量很少，这与组织表达谱分析中胚胎几乎无法检测到两个基因表达的结果是一致的。 获得了大白、梅山、长白等三个品种的猪MEF2B基因的第2、8内含子以及猪