商陆抗病毒蛋白基因转化黄瓜的研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kkai365
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄瓜在我国蔬菜周年供应上占有重要地位,但易受多种病害的危害而使产量降低、品质下降。传统的育种方法周期长、效率低,用传统的育种方法很难得到具有抗性的优良品种。 本试验以黄瓜自交系01、02、03的子叶节为外植体,利用农杆菌介导法将商陆抗病毒蛋白基因(PAP)导入黄瓜,建立了高效稳定的植株再生体系和遗传转化体系。探讨了影响遗传转化频率的主要因素,获得了阳性转基因植株。主要结果如下: 1.丛生芽诱导最佳的外植体类型是子叶节。基因型对不定芽分化频率影响很显著。自交系02不定芽分化频率最高,为80.0%;自交系03居中,为58.3%;自交系01最低,为33.3%。最佳不定芽分化培养基是MS+BA1.0mg/L,分化频率达81.8%。AgNO<,3>对黄瓜不定芽的分化有显著的促进作用,以2.0mg/L时分化频率最高,达90.8%。不定芽在MS培养基上的生根率达到100%。 2.遗传转化最适宜的条件:外植体预培养1d,侵染20-25min,共培养2-3d,转接至抑菌筛选培养基MS+BA1.0mg/L+Kan70mg/L+Carb300mg/L上进行培养,获得的抗性芽经伸长、生根培养,炼苗移栽能正常生长。 3.对再生植株进行PCR检测,PCR阳性率为57.14%,转化率为3.96%。利用Southern杂交进一步检测,得到6株转基因植株。初步证明目的基因已经整合到黄瓜基因组中。人工接种病毒结果显示,与对照植株相比,两株转基因植株对CMV具有抗性。
其他文献
新时代下中学语文教学,就是要有一个由教师和学生共同讨论策划出来的,也是教师和学生共同认为最有效的、老师指导学生高效率学习的方案.而特别是语文的教学,语文的教学最重要
期刊
The photovoltaic performance of CdS quantum dots sensitized solar cells (QDSSCs) using the 0.2 wt%of reduced graphene oxide and TiO2 nanoparticles (RGO+TiO2 nan
在对越南侵略者进行自卫还击作战中,我们有许多同志陆续到参战的广西边防部队进行自击还击战的采访报道工作。尽管大家来自四面八方,但在报社党委领导同志的直接带领和组织
期刊