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飞蝗是重要的农业害虫，具有很强的生殖能力。飞蝗的卵巢没有滋养细胞，是无滋式卵小管，卵成熟所需的卵黄原蛋白(vitellogenin，Vg)及其它大分子在脂肪体中合成，通过血淋巴运输到卵母细胞，这些过程受保幼激素(juvenilehormone，JH)调控。目前，对以飞蝗为代表的具有无滋式卵小管及由保幼激素调节的卵黄生成和卵母细胞成熟的分子机制缺乏了解，相关的研究报道较少。本论文的重点研究内容有两个:一是阐明保幼激素早期响应基因Krüppel-homolog1（Kr-h1）在飞蝗卵黄生成和卵母细胞成熟中作用，二是鉴定在飞蝗生殖过程中受保幼激素调节的microRNA(miRNA)，解析Argonaute1(Ago1)及依赖于Ago1的miRNA在飞蝗卵黄生成和卵母细胞成熟中的功能。 qRT-PCR的结果显示，Kr-h1的mRNA水平在雌性飞蝗进入卵黄生成期后显著升高。通过早熟素(precocene)剥夺内源保幼激素合成然后再进行外源保幼激素类似物methoprene处理能够迅速诱导Kr-h1的表达，而对保幼激素受体Methoprene-tolerant(Met)基因进行RNAi则导致Kr-h1的表达水平显著下降。萤光素酶报告实验表明，保幼激素通过Met及其共激活因子steroid receptor coactivator(SRC)直接调控Kr-h1的转录。Kr-h1 RNAi能够导致脂肪体中Vg的表达水平大幅度降低，卵母细胞内的脂滴积累显著减少，卵母细胞成熟受到抑制，卵巢发育停滞。这些表型与保幼激素缺失和Met RNAi的表型相似，说明Kr-h1在保幼激素调节的飞蝗生殖中发挥着重要作用，JH/Met/Kr-h1信号通路既抑制昆虫从幼虫到蛹的变态，也促进昆虫成虫的生殖。 利用miRNA测序和量化分析，在雌性飞蝗成虫脂肪体中鉴定了83个受保幼激素上调和60个受保幼激素下调的miRNA。对候选miRNA进行qRT-PCR验证，表明这些miRNA在飞蝗卵黄生成前期和卵黄生成期的表达水平与保幼激素的滴度正相关，并响应外源保幼激素的处理。进一步的研究发现，miRNA合成与功能执行中的两个重要基因Ago1和Dicer1的表达也响应保幼激素，对Ago1进行RNA干扰能够显著降低飞蝗脂肪体中Vg的表达量，阻碍卵母细胞和卵小管的正常发育。对Dicer1进行RNA干扰，能显著降低脂肪体中Vg的表达水平，影响卵母细胞成熟和卵巢生长，但只在羽化后6天的雌性飞蝗中观察到，表型也不及Ago1 RNAi。这些结果表明，保幼激素调节miRNA的表达，Ago1以及依赖于Ago1的miRNA在飞蝗这一具无滋式卵小管的昆虫的卵成熟中发挥重要作用。