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肺癌在20世纪末已成为各种癌症死亡的首要原因,目前发病率仍呈上升趋势。肿瘤转移是肿瘤发生和演变过程中最危险的阶段,临床上,60%以上的肺癌患者在发现肿瘤时已经转移,因此,加强肺癌及其转移的研究势在必行。本论文主要分为理论探讨和体外细胞实验两部分,理论部分分别从现代医学和中医学对恶性肿瘤转移的相关机制研究进展进行综述,并以中医络病学理论为指导,深入论述了恶性肿瘤及其转移的病机证治。认为恶性肿瘤形成及转移的主要病机演变过程是：病邪由气络至血络,导致痰瘀互结、癌毒凝聚而形成肿瘤；若肿瘤之伏毒进一步被激发,则可造成转移痛发生,依次传变,由轻而重。因而提出将络病思维引入恶性肿瘤及转移的治疗中。同时,全面阐述了益气养阴通络解毒法及其选方加味生脉饮的立法选方依据。体外细胞实验部分主要研究加味生脉饮含药血清对肺癌H460细胞增殖、周期、迁移、粘附的影响,以及对上皮间质转化的干预作用及其分子机制。目的：应用血清药理学方法,研究加味生脉饮含药血清对非小细胞肺癌H460细胞增殖、周期、迁移、粘附的影响,并检测上皮型标志物E-cad及间质型标志物Vimentin、N-cad蛋白及分子表达的变化,探讨加味生脉饮是否可以抑制H460细胞发生上皮间质转化,进而抑制非小细胞肺癌的转移。方法：给予家兔灌胃浓缩至一定生药含量的加味生脉饮,采血制备含药血清及空白血清,过滤,分装备用,实验分为10%、5%、2.5%含药血清组和10%空白血清组。体外培养H460细胞,采用MTT法测定不同含药血清对H460细胞增殖的影响；采用流式细胞仪测定不同含药血清对H460细胞周期的影响；采用划痕实验初步观察含药血清对H460细胞迁移的影响；采用Transwell技术观察含药血清对非小细胞肺癌迁移的影响(实验中发现H460细胞无法通过8mmTranswell膜,故改用非小细胞肺癌A549细胞替代H460细胞)；采用Matrigel铺胶模拟体内基底膜,观察含药血清对H460细胞粘附的影响；检测含药血清作用H460细胞后细胞E-cad 及 Vimentin蛋白含量的变化；采用RT-PCR法检测含药血清作用H460细胞后细胞Vimentin、N-cad表达的变化。结果：1.加味生脉饮含药血清对H460细胞在24h范围内有一定抑制增殖作用,与空白血清组比较均存在显著性差异(P<0.01),5%、10%含药血清组略优于阳性对照顺铂组,但48h时各组含药血清几乎无抑制细胞增殖作用。2.流式细胞术检测结果表明,不同浓度含药血清作用H460细胞24h后,和空白血清相比,各组含药血清S期细胞百分率均有增高,且存在一定的浓度-效应关系,10%含药血清S期比例高达61.1%,48h后含药血清组细胞主要集中在Go-G1期,而DDP继续集中在S期,S期细胞61.6%。3.划痕实验示,不同浓度含药血清处理H460细胞24h和48h后,含药血清划痕距离较空白血清组增加,呈现浓度和时间相关性,以上初步说明加味生脉饮对H460细胞具有抑制迁移的作用。4.Transwell实验研究表明,随着含药血清浓度的增高,迁移到膜下表面的A549细胞数降低,和空白血清对照组比较有显著性差异(P<0.01),5%含药血清和10%含药血清组迁移率仅为25.64%和13.31%。5.粘附实验发现,加味生脉饮药物血清作用H460细胞24h和48h后,与空白血清对照组比较,含药血清组细胞粘附率降低,与对照组有显著性差异(P<0.01),24h粘附率分别为93.51%、90.15%、82.47%(2.5%、5%、10%含药血清),48h粘附率分别为76.23%、68.33%、53.33%,血清浓度越高,粘附率越低,且48h较24h粘附率降低。6.Western blot实验发现,随着含药血清浓度的升高,E-cad蛋白含量升高,Vimentin蛋白含量降低,与空白血清对照相比均有显著性差异(P<0.01),且呈现浓度相关性,10%含药血清E-cad含量最高、Vimentin含量最低。7.RT-PCR实验结果示,作用时间一定时,随着含药血清浓度增加,Vimentin 和 N-cad这两种间质型分子的基因表达量呈下降趋势,与空白血清对照相比,除48h 2.5%含药血清组有统计学差异(P<0.05),其余含药血清组均有显著性差异(P<0.01)；血清浓度相同时,随着作用时间的延长,Vimentin和N-cad的表达亦逐渐下降；间质型标志物Vimentin 和N-cad的表达与含药血清浓度和作用时间负相关。结论：1.加味生脉饮对H460细胞增殖有一定的抑制作用,结合流式术检测结果,其对H460细胞24h的抑制增殖作用主要通过S期阻滞来实现,48h后药物对H460细胞无抑制增殖作用。2.加味生脉饮对H460细胞有抑制迁移、异质粘附的作用。3.加味生脉饮通过抑制H460细胞发生上皮间质转化进而抑制H460细胞转移。