C/EBPβ抑制恶性细胞增殖以及在ES细胞分化过程中的功能研究

来源 :中国科学院研究生院(上海生命科学研究院) | 被引量 : 1次 | 上传用户:xixiyibobo
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C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding proteinβ),又称NF-IL6,是一个与细胞增殖和分化密切相关的转录因子。首先,我们使用皮下荷人结肠癌肿瘤的裸小鼠作为模型,来研究C/EBPβ的过量表达和肿瘤生长的关系。我们用阳离子脂质体DOTAP:Chol作为载体,将C/EBPβ表达质粒pCN从尾静脉注射到裸小鼠体内。Southern blots分析证实,pCN的分布遍及小鼠的主要脏器及皮下肿瘤。用pCN/脂质体对荷瘤裸小鼠进行一段时间的实验性基因治疗后,所荷肿瘤的生长受到显著抑制。这种抑制同C/EBPβ的过量表达有关,在C/EBPβ过量表达的皮下肿瘤中,肿瘤细胞的凋亡率明显增加。进一步我们发现结肠癌细胞的凋亡可能与细胞周期依赖蛋白p21(Waf1/Cip1)的表达增强有关,与其上游基因p53无关。而在C/EBPβ与分化的研究中,我们考察了C/EBPβ在小鼠胚胎干细胞(ES cell)分化过程中的作用。我们发现在去除白血病抑制因子(LIF)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)后,转染了C/EBPβ的ES(C/EBPβ-ES)细胞能更长时间的保持未分化的形态,ES细胞Marker Oct-4、Nanog、及Sox2可以持续表达5~7天,并且C/EBPβ这种作用可被其拮抗物LIP所拮抗。C/EBPβ-ES细胞仍然具有分化能力,去除LIF进行悬滴培养可以形成拟胚体(EB),用RA诱导后向神经细胞分化。对培养10天的EBs进行cDNA芯片分析,证实在C/EBPβ-EB中,成纤维生长因子(FGF)的表达明显升高,说明C/EBPβ可能通过FGF信号通路诱导ES细胞的分化。以上的研究说明,C/EBPβ能在体内抑制结肠癌肿瘤的生长;在小鼠ES细胞中,外源C/EBPβ的过量表达利于ES细胞特性的维持,但并不抑制ES细胞分化。
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