清热解毒复方药物为临床常用药物，现代药理研究表明，此类药物具有抑菌、泄热、抗病毒等作用。　　 药品的质量可控性是药品的基本属性，是药品的安全性和有效性的基础。质量标准是监控药品质量的重要手段，是质量可控性的具体体现。经查阅大量文献，多种清热解毒复方药物制剂的质量控制方法已有报道，但其中仍有一些清热解毒复方药物制剂未见质量控制方法的报道或只有以其中一种或两种有效成分作为质量控制指标的报道，不能全面评价药品的内在质量，还有一些质量控制方法需要进一步改进和完善。　　 本课题选定四种清热解毒复方药物制剂抗感胶囊、湿毒清片、连花清瘟胶囊和热毒宁注射液以及金银花药材，以药物及药材中主要有效成分作为质量控制指标，采用反相高效液相色谱法，对药物的质量控制进行了较为系统的方法学研究。建立了同时测定抗感胶囊中绿原酸、咖啡酸、芍药苷、木犀草苷和芦丁的反相高效液相色谱法；湿毒清片中丹参素、阿魏酸、木犀草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、黄芩苷和隐丹参酮的反相高效液相色谱法；连花清瘟胶囊中绿原酸、连翘苷、芦荟大黄素、大黄素、大黄酸和大黄酚的反相高效液相色谱法；热毒宁注射液中绿原酸、咖啡酸和栀子苷的反相高效液相色谱法；金银花中绿原酸和木犀草苷的反相高效液相色谱法。所建立的方法专属性强，灵敏度高、精密度和稳定性良好，结果准确可靠，可做为上述清热解毒复方药物制剂的质量控制方法。　　 第一部分　　 目的：建立反相高效液相色谱法同时分离测定抗感胶囊中绿原酸、咖啡酸、芍药苷、木犀草苷和芦丁的含量。为抗感胶囊提供一种以5种有效成分作为质量控制指标的分析方法。　　 方法：(1)提取方法：比较不同提取溶剂及提取时间对抗感胶囊有效成分的提取效率，选择提取成分多，提取效率高的提取方法。(2)反相高效液相色谱条件的优化：选择合适的固定相，调整流动相的组成、配比、流速，设计梯度洗脱程序及检测方法等色谱条件,以使绿原酸、咖啡酸、芍药苷、木犀草苷和芦丁色谱峰与其它峰完全分离。(3)系统适用性实验：在已确定的色谱条件下，考察5种待测成分色谱峰的分离度、理论塔板数、对称因子是否符合要求。(4)制备标准曲线；进行最低检测限实验、精密度实验、稳定性实验和重复性实验。(5)加样回收率实验。(6)样品含量测定。　　 结果：(1)提取方法：精密称取抗感胶囊样品，用70[％]甲醇超声提取30min，使各有效成分在此提取条件下达到最大的提取效率。　　 (2)反相高效液相色谱条件：采用DiamonsilTMC18 色谱柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，以甲醇(A)-0.5[％]冰醋酸(B)为流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为：A：0～12min，34[％]；12～22min，线性改变至58[％]，22～30min，58[％](A+B=100[％])。流速为1.0 ml/min ；柱温为30℃；检测波长270nm。　　 (3)系统适用性实验：在此色谱条件下，5种指标成分色谱峰的理论塔板数均大于5000，与相邻色谱峰的分离度均大于2。　　 (4)专属性实验：在上述色谱条件下进样，阴性对照样品的色谱图与样品色谱图进行比较，阴性对照样品无干扰。　　 (5)标准曲线的制备：绿原酸、咖啡酸、芍药苷、木犀草苷和芦丁进样量分别在0.2310～3.465μg、0.03780～0.5670μg、0.2924～4.386μg、0.04520～0.6780μg和0.1438～2.157μg 范围内呈良好的线性关系，相关系数分别为1.000、0.9999、0.9997、0.9998和0.9999。　　 (6)最低检测限实验：绿原酸、咖啡酸、芍药苷、木犀草苷和芦丁的最低检测限分别为0.028、0.011、0.24、0.011、0.024 μg/ml。　　 (7)精密度实验：五种有效成分峰面积的RSD分别为0.36[％]、0.55[％]、0.84[％]、0.34[％]、0.17[％]。　　 (8)稳定性实验：五种有效成分峰面积的RSD分别为1.8[％]、1.5[％]、0.76[％]、1.0[％]、0.52[％]，样品在24h 内稳定。　　 (9)重现性实验：以五种有效成分的峰面积计算所得重现性实验的RSD分别为0.35[％]、1.1[％]、0.8[％]、1.0[％]、0.9[％]。　　 (10)加样回收率实验：绿原酸、咖啡酸、芍药苷、木犀草苷和芦丁的平均加样回收率分别为98.5[％]、98.4[％]、97.3[％]、98.6[％]和99.9[％]，RSD分别为1.1[％]、0.9[％]、1.1[％]、1.0[％]和0.28[％]。　　 (11)含量测定：在所建立的色谱条件下，对不同批次的抗感胶囊中有效成分的含量进行同时测定，由外标法计算样品中有效成分的含量。　　 第二部分　　 目的：研究建立反相高效液相色谱法同时测定湿毒清片中丹参素、阿魏酸、木犀草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、黄芩苷和隐丹参酮7种成分的含量。　　 方法：采用DiamonsilTM C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：甲醇-1[％]冰醋酸，梯度洗脱，流速1.0 ml/min，柱温30℃，检测波长250 nm。　　 结果：在上述色谱条件下，7种成分可完全分离。丹参素、阿魏酸、木犀草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、黄芩苷和隐丹参酮在0.1642～2.464μg、0.007600～0.1140μg、0.03616～0.5424μg、0.05184～0.7776μg、0.2870～4.305μg、0.2400～3.600μg和0.02085～0.3128μg 范围内线性关系良好，相关系数分别为0.9999、0.9997、1.000、0.9998、0.9999、0.9998和1.000。　　 丹参素、阿魏酸、木犀草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、黄芩苷和隐丹参酮的平均回收率分别为97.1[％]、96.7[％]、99.2[％]、96.4[％]、98.2[％]、99.6[％]和100.2[％]，RSD分别为1.5[％]、1.4[％]、1.3[％]、1.7[％]、1.3[％]、0.68[％]和0.53[％]。　　 第三部分　　 目的：研究连花清瘟胶囊中绿原酸、连翘苷、芦荟大黄素、大黄素、大黄酸和大黄酚6种成分的含量和测定方法。　　 方法：采用反相高效液相色谱法，色谱柱为DiamonsilTMC18(250mm×4.6mm，5μm)，乙腈-0.5[％]冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1.0 ml/min，检测波长245 nm，柱温30℃。　　 结果：在此色谱条件下，6种成分可完全分离。绿原酸、连翘苷、芦荟大黄素、大黄素、大黄酸和大黄酚的进样量分别在0.2775～3.052μg、0.07410～0.8151μg、0.006240～0.06864μg、0.01661～0.1827μg、0.03600～0.3960μg和0.05355～0.5890μg 范围内线性关系良好，相关系数分别为0.9996、0.9999、1.000、0.9998、0.9999和0.9997。绿原酸、连翘苷、芦荟大黄素、大黄素、大黄酸和大黄酚的平均回收率分别为98.2[％]、100.6[％]、97.0[％]、96.4[％]、99.0[％]和97.3[％] (n=9)，RSD<2.0[％]。　　 第四部分　　 目的：建立反相高效液相色谱法同时测定热毒宁注射液中绿原酸、咖啡酸和栀子苷3种成分的含量。　　 方法：采用DiamonsilTMC18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，以甲醇-0.1[％]磷酸(22:78)为流动相，流速1.0 ml/min，检测波长218 nm，柱温30℃。　　 结果：绿原酸、咖啡酸和栀子苷的进样量分别在0.1848～2.772μg、0.03780～0.5670μg和0.2030～3.045μg 范围内线性关系良好，相关系数分别为0.9999、1.000和0.9999。绿原酸、咖啡酸和栀子苷的平均回收率分别为98.6[％]、100.3[％]和98.2[％]，RSD<2.0[％]。　　 第五部分　　 目的：建立反相高效液相色谱法同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量。　　 方法：采用DiamonsilTMC18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.5[％]冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为1.0 ml/min,检测波长350nm，柱温30℃。　　 结果：绿原酸和木犀草苷的进样量分别在0.3872～2.710μg和0.05424～0.3797μg 范围内呈良好的线性关系，相关系数分别为1.000和1.000，平均加样回收率绿原酸为101.2[％](RSD=1.2[％])，木犀草苷为96.8[％](RSD=1.3[％])。