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本研究旨在探究短链脂肪酸(Short-chain fatty acids,SCFAs)调节猪卵巢颗粒细胞(Porcine granulosa cells,PGCs)性激素分泌的cAMP-PKA信号通路。试验分别采用不同浓度梯度(0、0.005、0.05、0.5、5、10mM)的乙酸、丙酸、丁酸,以及PKA激动剂Forskolin和cAMP的抑制剂Bupivacaine处理PGCs,分析 SCFAs 对 PGCs 的 G 蛋白偶联受体 41(G protein coupled receptors 41,GPR41)和 GPR43、cAMP、孕酮(Progesterone,P4)、雌二醇(Estradiol,E2)及类固醇激素合成相关功能基因表达的影响。1 SCFAs对PGCs性激素合成的影响0.005～20 mM乙酸、0.005～0.05 mM丙酸对PGCs的P4分泌无显著影响。但0.05 mM 丁酸显著促进PGCs的P4分泌(P<0.05),0.5～10 mM丙酸、5～10 mM丁酸均显著抑制P4分泌(P<0.05)。0.05～20 mM乙酸、5～10 mM丙酸和丁酸显著促进PGCs的E2分泌(P<0.05)。10 μM Forskolin 显著促进 PGCs 的 P4 和 E2 分泌(P<0.05)。5 mM 乙酸、丙酸、丁酸分别与10 μM Forskolin共处理组P4含量均显著低于10μM Forskolin处理组(P<0.05),E2水平均显著低于5 mM乙酸(P<0.05)和10μM Forskolin处理组(P<0.05)。2.3 μM Bupivacaine显著抑制P4的分泌(P<0.05),但不影响E2分泌。5 mM乙酸与2.3 μM Bupivacaine共处理组E2水平显著高于2.3μM Bupivacaine处理组(P<0.05),低于 5 mM 乙酸处理组(P<0.05)。5 mM 丙酸与 2.3μM Bupivacaine共处理组E2水平显著低于5 mM丙酸处理组(P<0.05);5 mM 丁酸与2.3μM Bupivacaine共处理组P4含量显著低于2.3 μM Bupivacaine处理组(P<0.05)。2 SCFAs对PGCs内cAMP-PKA信号通路的影响2.1 GPR41 和 GPR43 的表达10 μMForskolin、2.3 μMBupivacaine、0.005～10mM 乙酸、0.005-0.5 mM 丙酸和0.005～5 mM 丁酸对PGCs的GPR41和GPR43 mRNA的表达无显著影响。5～10 mM丙酸、10 mM 丁酸均显著上调PGCs的GPR41和GPR43 mRNA表达(P<0.05)。5 mM乙酸与10 μM Forskolin共处理显著上调PGCs的GPR41和GPR43 mRNA表达(P<0.05);5 mM丙酸与10 μM Forskolin共处理显著上调PGCs的GPR41 mRNA 表达(P<0.05),显著下调 PGCs 的 GPR43 mRNA 表达(P<0.05);5 mM 丁酸与 10 μM Forskolin 共处理对 PGCs 的 GPR41 和 GPR43 mRNA 的表达无显著影响。5mM 乙酸、丁酸分别与2.3 μMBupivacaine共处理对PGCs的GPR41、GPR43 mRNA表达均无显著影响。5 mM丙酸与2.3 μM Bupivacaine共处理显著上调PGCs 的 GPR43 mRNA 水平(P<0.05)。2.2 cAMP10 pM Forskolin显著上调细胞内cAMP的含量(P<0.05),5 mM乙酸、丙酸、丁酸分别显著下调PGCs的cAMP含量(P<0.05),5mM乙酸、丙酸、丁酸分别与10μM Forskolin共处理不影响Forskolin对cAMP含量的上调作用。2.3 μM Bupivacaine 显著下调 PGCs 内 cAMP 含量(P<0.05),2.3 μM Bupivacaine分别与5 mM乙酸、丙酸、丁酸的共处理组PGCs内cAMP含量均显著低于2.3pM Bupivacaine处理组和5 mM乙酸、丙酸、丁酸处理组(P<0.05)。3 SCFAs对PGCs类固醇激素合成功能基因表达的影响10 μM Forskolin显著下调PGCs的ER-β mRNA表达(P<0.05),显著上调SF-1、StAR、3β-HSD、P450scc mRNA 表达量(P<0.05)。2.3μM Bupivacaine显著上调ER-β mRNA的表达(P<0.05)、下调StAR、P450scc mRNA表达(P<0.05)。5 mM乙酸显著上调StAR mRNA的表达(P<0.05),显著下调ER-β mRNA的表达(P<0.05)。5 mM 乙酸+10 μM Forskolin 共处理组 SF-1、StAR、3β-HSD、P450scc mRNA 水平显著高于 5 mM 乙酸处理组(P<0.05)。2.3μM Bupivacaine+5 mM乙酸处理组ER-β mRNA表达量显著高于5 mM乙酸处理组,低于2.3 μM Bupivacaine 处理组(P<0.05)。5 mM 丙酸显著下调 ER-β、SF-1、StAR、P450scc mRNA 的表达(P<0.05)。10μMForskolin+5mM 丙酸处理组 SF-1、StAR、3β-HSD、P450sccmRNA 水平低于 10 μM Forskolin组(P<0.05),高于 5 mM 丙酸组(P<0.05)。2.3 μM Bupivacaine+5 mM丙酸处理组ER-β、SF-1、StARmRNA显著高于5 mM丙酸组(P<0.05),3β-HSD 低于 5 mM 丙酸组(P<0.05),ER-β 和 StAR mRNA 低于2.3μM Bupivacaine 处理组(P<0.05)。5 mM 丁酸显著上调 3β-HSD mRNA 表达(P<0.05),下调 ER-β、SF-1、StAR、P450scc mRNA 表达(P<0.05)。10 μM Forskolin+5 mM 丁酸处理组 StAR、3β-HSD、P450scc mRNA 表达量显著低于 10 μM Forskolin 处理组(P<0.05)。2.3 μM Bupivacaine+5 mM 丁酸共处理组ER-β、SF-1 mRNA表达量显著高于5 mM 丁酸处理组(P<0.05),3β-HSD mRNA 表达量显著高于 2.3 μM Bupivacaine处理组(P<0.05),ER-β、StAR mRNA 表达量显著低于 2.3 μM Bupivacaine 处理组(P<0.05)。总结:SCFAs通过PGCs上GPR41和GPR43介导cAMP-PKA通路影响PGCs孕酮和雌二醇的合成与分泌。