目前已知催化花生四烯酸转化为前列腺素的酶有两种同工酶，环氧合酶-1(COX-1)和环氧合酶-2(COX-2)。COX-1为管家基因编码，它与正常细胞的前列腺素(PGs)合成有关，主要功能是保护胃肠道和调节肾血流量。COX-2为诱导酶，在多数正常细胞没有表达，但可被一些炎症细胞因子、肿瘤促进因子、生长因子和癌基因迅速诱导，形成的过量PGs导致红、肿、疼痛、发热等。经典的非甾体抗炎药物(NSAIDs)既抑制COX-1也抑制COX-2，大量资料显示NSAIDs有抑癌的作用，并且普遍认为这种抑癌作用的机理主要是抑制了COX-2信号途径，通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、调控细胞分化、调节免疫应答、抑制上皮细胞恶性转变、抑制肿瘤细胞的侵袭能力等多种途径抑制肿瘤的生长，但迄今对NSAIDs与肿瘤血管生成的关系研究较少。因此，本研究以移行细胞癌(TCC)为研究对象，从下面三个方面研究COX-2及NSAIDs与肿瘤血管生成和侵袭转移能力的关系：临床TCC肿瘤标本中COX-2表达与侵袭和微血管密度MVD的关系；用cox-2基因转染移行细胞癌细胞株EJ，比较空质粒转染对照mock-EJ组与EJ-COX2组细胞侵袭能力及促进共培养的内皮细胞迁移的能力的差异，并观察选择性COX-2抑制剂NS-398和非选择性COX抑制剂吲哚美辛对两种能力的影响，RT-PCR检测与肿瘤细胞侵袭转移能力和促血管生成能力相关的指标：血管内皮生长因子VEGF、尿激酶型纤溶酶原激活因子uPA和基质金属蛋白酶MMP-2表达的变化；最后将mock-EJ和EJ-COX2细胞株接种到裸鼠体内，观察它们的血管形成情况与相关因子的表达情况。主要结果如下：1. 采用免疫组化技术，检测临床TCC肿瘤标本中COX-2的表达及Ⅷ因子染色后的微血管计数，分析COX-2的表达与TCC侵袭和微血管密度(MVD)的关系，结果发现：(1) COX-2的表达与TCC侵袭性呈正相关。COX-2仅表达于侵袭性TCC中，并且随着侵袭程度的加深，COX-2的阳性表达率显著上升，COX-2表达与TCC侵袭程度间有显著正相关关系； (2)MVD与TCC侵袭性相关。MVD在各级非侵袭性的TCC标本间没有显著性差异，但侵袭性TCC 的MVD比非侵袭性的MVD显著增加，MVD与侵袭程度之间有显著正相关性；(3)MVD与 COX-2的表达显著相关。COX-2阳性病例的MVD比COX-2阴性病例的MVD显著增加，随着COX-2阳性率的增加，MVD<WP=9>也在增加，两者间有显著正相关性。2. 采用转染、肿瘤细胞侵袭实验、体外内皮细胞迁移实验、RT-PCR和Western blot等技术，体外研究COX-2、非选择性COX抑制剂吲哚美辛和选择性COX-2抑制剂NS-398对移行细胞癌细胞株EJ侵袭能力及促血管生成能力的影响，结果发现：(1) COX-2能促进EJ细胞的生长，COX-2特异性抑制剂NS-398和非特异性抑制剂吲哚美辛都能呈剂量依赖地抑制肿瘤细胞的生长；(2) COX-2能显著促进EJ- COX2 肿瘤细胞的侵袭能力，NS-398和吲哚美辛均能明显地呈剂量依赖关系地抑制其移动能力。吲哚美辛能呈剂量依赖地抑制mock-EJ的侵袭能力，但 NS-398 对 mock-EJ的侵袭能力没有影响；(3) EJ-COX2 中过表达的COX-2能促进共培养的内皮细胞穿过基质的能力，NS-398能抑制与EJ-COX2共培养的内皮细胞的迁移，但NS-398 对与mock-EJ 共培养的ECV304的迁移没有影响，而吲哚美辛能呈剂量依赖地抑制分别与 mock-EJ 和EJ-COX2 共培养的内皮细胞的迁移。因此NS-398 抑制血管生成是通过肿瘤细胞而起作用，吲哚美辛对血管生成的抑制作用则不完全依赖于肿瘤细胞，可能直接作用于内皮细胞；(4) COX-2能促进EJ-COX2表达 VEGF, uPA和 MMP-2，NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2, VEGF, uPA 和 MMP-2的表达，吲哚美辛也有相似的效果。因此EJ-COX2　中高表达的COX-2能通过激活VEGF, uPA 和 MMP-2的表达促进肿瘤细胞的侵袭能力和血管生成能力。 选择性COX-2 抑制剂NS-398 和非选择性COX抑制剂吲哚美辛都能通过抑制VEGF, uPA 和 MMP-2的表达抑制EJ-COX2的侵袭能力和血管生成能力。3. 采用裸鼠成瘤实验、IHC、RT-PCR和Western blot等技术，在体研究COX-2、吲哚美辛对移行细胞癌细胞株EJ裸鼠移植瘤的侵袭能力及促血管生成能力的影响，结果发现：(1) COX-2能促进EJ-COX2裸鼠移植瘤的生长，吲哚美辛能抑制EJ-COX2裸鼠移植瘤和mock-EJ裸鼠移植瘤的生长；(2) EJ-COX2中高表达的COX-2能大大促进裸鼠移植瘤的血管形成，其MVD与mock-EJ组间有显著差异。吲哚美辛既能抑制EJ-COX2裸鼠移植瘤的血管生成，也能抑制mock-EJ裸鼠移植瘤的血管生成；(3) EJ-COX2中高表达的COX-2能促进裸鼠移植瘤中VEGF，uPA和MMP-2的表达，吲哚美辛既能抑制EJ-COX2移植瘤中VEGF，uPA和MMP-2的表达，也能抑制mock-EJ裸鼠移植瘤中VEGF，uPA和MMP-2的表达。因此，本课题从临床TCC标本的免疫组化分析、体外侵袭与促血管形成能力的研究和在体裸鼠移植瘤血管形成与相关因子的研究这三个方面，阐述了COX-2及非甾体抗炎药物对人移行细胞癌血管生成及侵袭能力的影响。结果表明COX-2能促进人移行<WP=10>细胞癌的侵袭能力和血管生成能力，NS-398和吲哚美辛能抑制TCC的血管生成和侵袭能力及相关因子的表达。