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实验目的探讨CD45RO~+ T细胞和CD68~+细胞在外阴上皮内非瘤样病变和外阴癌发生、发展过程中的表达及作用。实验方法一、材料收集中国医科大学附属第一医院妇科手术病人石蜡组织标本,分别取外阴正常皮肤10例、外阴鳞状上皮细胞增生20例、外阴硬化性苔藓20例,外阴鳞状上皮癌20例。以上标本均经病理证实。二、试剂鼠抗人单克隆抗体CD68和CD45RO,S-P超敏试剂盒均购于福州迈新生物技术有限公司。三、免疫组化检测采用免疫组化S-P法分别检测CD45RO~+ T细胞、CD68~+细胞在各20例外阴鳞状上皮细胞增生、外阴硬化性苔藓、外阴鳞状上皮癌病变中的表达,取10例外阴正常皮肤作对照。四、结果判定CD68蛋白阳性染色定位于细胞浆,CD45RO蛋白阳性染色定位于细胞膜/浆,阳性细胞染色程度均为明显的棕黄或棕褐色,多分布于真皮层。每张切片选取真皮层内5个不同视野,计算同一张切片的平均积分光密度值,其代表阳性染色细胞在该组织中的表达水平。五、统计学分析利用SPSS 11.5统计分析软件,各组计量资料的结果进行t检验,采用Pearson相关分析,并绘制散点图,P<0.05有统计学意义。实验结果CD45RO~+ T细胞和CD68~+细胞在外阴正常皮肤中表达水平极低,明显低于外阴鳞状上皮细胞增生、外阴硬化性苔藓和外阴鳞状细胞癌病变(P<0.05)。它们在外阴硬化性苔藓晚期病变中表达明显高于早期病变(P<0.05);在中高分化外阴鳞状细胞癌组织中表达明显高于低分化外阴鳞状细胞癌组织(P<0.05)。CD45RO~+ T细胞在中高分化外阴鳞状细胞癌组织中表达最高,其次是晚期硬化性苔藓(P<0.05);CD68~+细胞在中高分化外阴鳞状细胞癌和晚期硬化性苔藓病变中表达最高,但二者之间没有统计学差异(P>0.05);它们均明显高于外阴鳞状细胞增生、低分化外阴鳞状细胞癌和早期硬化性苔藓(P<0.05),而在后三者之间表达没有明显差异(P>0.05)。CD68~+细胞和CD45RO~+ T细胞在外阴不同病变中表达具有正相关性,相关系数为0.742(P<0.001),而且CD68~+细胞多出现在CD45RO~+ T细胞的周围,且多在病变浅层。结论CD45RO~+ T细胞和CD68~+细胞参与皮肤的免疫反应,它们相互协同作用,在外阴上皮内非瘤样病变和外阴癌发生发展过程中发挥免疫调节作用。