黄曲霉是一种常见的腐生真菌,其次级代谢产物黄曲霉毒素的污染严重威胁着人类的健康安全。已有的研究表明,组蛋白H3K79位点上的甲基化修饰与生物体的生长、发育以及次级代谢产物的合成等生命活动密切相关。在酵母中组蛋白甲基转移酶DOT1蛋白负责组蛋白H3K79位点上的甲基化修饰。通过氨基酸序列比对,我们鉴定了黄曲霉组蛋白甲基转移酶DOT1,并推测黄曲霉组蛋白甲基转移酶DOT1通过甲基化组蛋白H3K79位点进而参与黄曲霉生命活动的调控。本研究利用同源重组的原理,获得了黄曲霉组蛋白甲基转移酶的基因敲除及回补突变株,并初步揭示了其在黄曲霉生长、产孢、黄曲霉毒素的合成及致病过程中的功能,具体研究结果如下:与野生型以及回补菌株的菌落相比,缺失dot1基因后,黄曲霉菌落直径明显变小,生长速率显著降低;敲除突变株的分生孢子数量以及分生孢子梗数量均显著降低,敲除突变株的产孢能力下降;敲除突变株的菌核数目相对于野生型与回补突变株都显著增加,表明敲除株的产菌核能力增强;通过薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析了黄曲霉毒素的产量,发现Δdot1突变株的黄曲霉毒素的产量显著下降,表明其正相关黄曲霉毒素的合成。响应压力实验表明,Δdot1突变株相较于野生型以及回补突变菌株对细胞膜损伤剂十二烷基硫酸钠(SDS)的敏感程度降低;对氧化剂叔丁基过氧化氢(tBOOH)的敏感程度也降低;并且,对基因组损伤剂甲磺酸甲酯(MMS)的敏感程度也有所降低,这些结果暗示了dot1基因在黄曲霉的压力响应中具有重要作用。对玉米种子侵染的实验结果表明,Δdot1突变株相对于野生型以及回补突变菌株侵染玉米的能力降低,并且,侵染后产生孢子数量以及黄曲霉毒素产量都显著降低,这表明DOT1参与了黄曲霉侵染植物种子的过程。亚细胞定位实验表明,组蛋白甲基转移酶DOT1定位在黄曲霉菌株的细胞核中。综合上述结果,我们推测AfDOT1蛋白很可能可能通过对组蛋白H3K79位点的甲基化来参与调控黄曲霉菌株的生长、发育以及黄曲霉毒素的合成代谢,并且在响应外界的细胞壁损伤压力、氧化压力以及基因组损压力中都发挥着重要作用。本研究为AfDOT1蛋白的功能解析提供了基础数据,并且为黄曲霉毒素的科学防治提供了潜在的新靶点。