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牙髓治疗的最终目标是维持牙髓-牙本质复合体的活性和生理功能,应用生长因子进行盖髓以保存牙髓活力是当前该领域研究的焦点和热点之一。血管内皮生长因子是当前已知促血管生成和新生能力最强的生长因子,同时VEGF能促进创伤后的组织修复愈合,与牙髓损伤后的修复过程关系密切。本论文分两部分,第一部分观察研究血管内皮生长因子对鼠牙髓损伤后的修复作用效果。第二部分探讨制作一种能包载VEGF165基因具有缓释功能的微球,以便能更好的应用于动物体内。实验一VEGF165与BMP-2大鼠磨牙盖髓的实验研究目的:应用血管内皮生长因子(VEGF165)和VEGF165与BMP-2联合作用用于对大鼠磨牙进行盖髓,观察其对损伤牙髓的作用与影响。方法:成年雄性Wistar大鼠12只,每只大鼠选用4颗第一磨牙,共48颗牙齿。随机分为2组,每组6只大鼠,24颗牙齿。两组分别用浸有VEGF165液和VEGF165与BMP-2混合液的胶原海绵进行盖髓。分别于术后1周、2周和6周处死各组中的2只动物。拔除实验牙齿,进行组织学处理,观察穿髓孔处牙髓炎症反应情况和修复性牙本质形成情况。结果:VEGF165组:1周时穿髓孔下炎症反应明显,2周时部分牙齿穿髓孔处可见散在牙本质样组织,6周时可见有桥状牙本质生成,牙髓组织恢复正常。VEGF165与BMP-2混合组:1周时穿髓孔下方大量炎症细胞聚集,反应明显。2周时,穿髓孔下方可见部分散在晶体样物生成,在6周时有牙本质桥生成,覆盖穿髓孔表面。结论:VEGF165和BMP-2作为盖髓剂有促进牙髓创伤愈合的作用,可能是一种比较有发展潜力的生物活性盖髓材料。实验二包载VEGF165基因纳米微球的制备及性能研究目的:以聚乳酸羟基乙酸(PLGA)为载体材料制备包载血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)纳米微球,并对所制备的微球相关特性和体外释放速率进行研究。方法:1.应用质粒提取盒从提取VEGF165质粒2.以可生物降解材料聚乳酸羟基乙酸(PLGA)为载体材料,采用高速搅拌复乳溶剂挥发法制备载VEGF165纳米微球。3.应用扫描电镜进行表面形态和结构观察。测定其VEGF165基因含量和包封率,建立体外释放模型,并通过体外释放试验观察其体外释放速率。结果:采用高速搅拌复乳溶剂挥发法制备的载VEGF165纳米微球包封率为46.45%,微球载药量为0.783%。扫描电镜观察显示,粒子为圆形,粒径大小在300-500nm之间。体外释放试验结果表明制备的VEGF165微球2周时药物累积释放药量近70%。结论:采用高速搅拌复乳溶剂挥发法制备载VEGF165纳米微球表面形态结构稳定,粒径均匀,具有良好的体外缓释效果。