目的：构建pCDF-Twist慢病毒表达载体，在结肠癌HT29细胞系中高表达Twist，研究Twist对结肠癌细胞侵袭转移的影响。检测Twist在不同结肠癌组织中的表达。方法：用RT-PCR的方法克隆出人Twist的基因序列，酶切后插入pCDF质粒构建pCDF-Twist慢病毒真核表达载体，酶切及测序鉴定后包装慢病毒感染结肠癌HT29细胞系，获得Twist高表达的细胞株并检测Twist、E-cadherin、Vimentin等相关蛋白的表达情况。细胞划痕实验观察Twist对HT29细胞迁移能力的影响。收集48例结肠癌手术标本（包括癌旁组织标本）。用免疫组化方法检测分析Twist在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达情况。结果：1. pCDF-Twist质粒经酶切、测序鉴定正确，荧光图像显示慢病毒构建成功。2. Western Blot检测结果显示稳定感染pCDF-Twist慢病毒的HT29细胞中Twist、Vimentin表达水平增高，E-cadherin表达下降。3.划痕实验显示感染慢病毒后HT29细胞迁移能力增加。4.免疫组化提示结肠癌组织Twist表达高于癌旁组织，并且与肿瘤分期正相关。结论：正确构建了pCDF-Twist真核表达载体，并且在HT29细胞中成功选出高表达Twist的细胞株。Twist在促进结肠癌细胞的侵袭与转移等生物学过程中其重要作用。