木薯有性四倍体农艺性状及遗传稳定性鉴定

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木薯(Manihot esculenta Crantz),大戟科木薯属,起源于热带美洲的灌木状多年生作物,广泛种植于热带及亚热带地区。由于木薯的淀粉含量高,且其生长环境的适应性,木薯已成为重要的经济及能源作物。由于木薯产品主要来自块根,多倍体育种对木薯产业具有良好的应用前景。目前,木薯的多倍体育种大多是采用体细胞加倍的无性多倍化途径,而这些无性多倍体由于诱导细胞加倍的不同步,往往出现混倍性的嵌合性现象而影响其后代性状的遗传稳定。因此,通过2n配子途径产生的有性多倍体由于具有更高的倍性纯合度,则可获得更好的遗传稳定性,同时有性过程可促进优良基因组间的遗传物质重组,产生杂种优势。本研究采用课题组所获得的首例木薯有性四倍体材料,通过连续三代的无性繁殖株系比较,采用形态学、细胞学、生理生化特性以及SRAP分子标记进行鉴定,分析其后代繁殖的遗传稳定性表现,并对其主要农艺性状表现初步分析。研究结果如下:(1)木薯有性四倍体后代各繁殖系其外部形态均明显呈多倍化特征,叶片巨大、颜色较深,其叶片长、裂叶宽、叶柄长在发育期都显著大于二倍体(SC5);并且叶形指数、叶片数显著低于SC5,在11月底到12月底之间SC5叶片凋零速度明显比有性四倍体快。株型相关指标也发生了变化,有性四倍体株高、茎粗在种植前期有着显著优势,但在生长稳定期后与SC5差异不显著,分枝数远低于SC5;木薯有性四倍体各繁殖系之间外部形态特征具有稳定性。(2)以二倍体SC5为对照,采用流式细胞术和染色体计数法测定了木薯有性四倍体M1-M3繁殖系的DNA含量以及细胞染色体数,明确了各代繁殖系的细胞染色体数为2n=72,且有性四倍体各代繁殖系之间四倍细胞(2n=72)率均在90%以上,可以确定其为稳定的纯合四倍体。(3)蛋白质含量测定及聚丙稀铣胺凝胶电泳结果显示,木薯有性四倍体蛋白质含量显著低于SC5,有性四倍体各繁殖系及SC5蛋白质电泳谱带基本一致。(4)本试验采用SRAP分子标记法对木薯有性四倍体进行遗传分析,用20对SRAP引物组合对其基因组DNA进行多态性扩增,结果表明有性四倍体各繁殖系之间差异性条带占1.85%,各繁殖系之间基因组SRAP多态性低,遗传差异小,这也证实了木薯有性四倍体在经过多代繁殖后,其遗传稳定性较好。(5)对木薯有性四倍体块根和淀粉主要农艺性状进行初步测定,实验表明其株系的块根产量略低于SC5但差异不显著、但生物学产量显著低于SC5,在收获期其干物率积累与SC5无显著差异。淀粉含量的测定结果显示,木薯有性四倍体块根淀粉含量显著低于SC5,且各繁殖系差异不显著。
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