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马立克氏病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)和网状内皮增生症病毒(REV)是引起鸡肿瘤的最常见病原。目前,临床中存在肿瘤病毒混合感染比较普遍的情况。通过对2010-2012年间16群主要来自广西的疑似肿瘤病的病鸡进行了剖检、肿瘤组织PCR检测、病毒分离鉴定及部分新鲜活体的可疑肿瘤组织病理组织学观察。PCR检测结果发现,16群可疑病鸡中7群为MDV单一感染(43.75%)、2群为ALV-J单一感染(12.5%)、3群为MDV和ALV-J混合感染(18.75%)、3群为MDV、ALV-J和REV混合感染(18.75%)及1群为MDV和ALV-D混合感染(6.25%)。说明近两年引起肉眼可见肿瘤病变的病原主要是MDV单一感染或MDV和ALV、REV混合感染。应用SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)分离培养技术和接种病毒的细胞培养物间接免疫荧光试验(IFA)、分离株基因序列分析方法,获得了6株MDV-1,属超强毒MDV(vvMDV)或特超强毒MDV(vv+MDV)、5株ALV-J、1株初步鉴定为ALV-D和1株REV。其中1株MDV-1混合ALV-J的感染,1株MDV-1混合REV和ALV-J的感染。疑似ALV-D的毒株需要得到更多的序列才能确定含有哪些成分。取部分病料的新鲜活体制作病变组织的石蜡切片,在显微镜下观察到了MDV单一感染引起的淋巴细胞肿瘤和MDV和ALV-J混合感染引起的髓细胞瘤及淋巴细胞和髓细胞混合的肿瘤。由鸡肿瘤病毒引起的肿瘤组织病理变化与由鸡白痢沙门氏菌慢性感染引起的心脏肉芽肿和肝脏坏死组织病理变化存在明显差别。应用PCR方法对17个批次的商品MDV-1活疫苗和9枚SPF鸡胚进行了外源性ALV和REV的检测,结果均没有扩增出目的片段,初步说明所检样品中没有外源性ALV和REV污染。