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目的研究准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)术中瞬时高眼压对视网膜神经节细胞凋亡的影响。方法1.动物模型制作:使用LASIK手术中负压发生器,用负压环吸引新西兰白兔实验眼(眼压＞60mmHg),负压吸引时间分别持续20s、45s及2min,制作瞬时高眼压模型。PTK去除角膜上皮(切削直径为6.5mm,切削深度为50μm),按照-9.00D进行准分子激光切削(切削直径为6.5mm,切削深度为127μm),激光波长193nm,能量密度125mJ/cm~2,脉冲频率10Hz。2.视网膜神经节细胞凋亡观察:48只新西兰白兔实验眼,负压吸引分别持续20s、45s及2min后,分别于术后即刻、术后7d,14d,28d处死,透射电镜鉴定视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的存在。利用TUNEL检测视网膜神经节细胞的凋亡。结果视网膜神经节细胞凋亡观察:实验对照组、负压吸引20s、负压吸引45s及负压吸引2min组之间TUNEL-N末端标记的凋亡RGCs数差异无统计学意义。视网膜各层病理改变:负压吸引20s后即刻、7d、14d及28d组,可见视网膜各层结构完整,层次清晰。视神经结构完整,视网膜神经节细胞结构完整。负压吸引45s后即刻组,视网膜各层结构完整,内、外核层排列整齐。2min组术后7d可见视神经纤维髓鞘结构紊乱,其内电子密度下降,微管和微丝不明显,视网膜神经节细胞线粒体肿胀变圆、嵴断裂,空泡变性,至28d时恢复正常。结论LASIK术中常规负压吸引20s、45s不会导致视网膜神经节细胞的凋亡,负压吸引持续时间延长至2min会引起视网膜神经纤维层、视网膜神经节细胞层和内核层的组织结构的改变,但不会导致视网膜神经节细胞明显的凋亡。负压吸引时间越长改变越明显,修复期也越长,可能导致视网膜神经节细胞的凋亡。