背景:近年来子宫内膜癌（Endometrial carcinoma,EC）的发生率明显上升,虽然前人研究发现EC与许多危险因素相关,但其发病原因迄今尚不明确。为了阐明其发生、侵袭、转移的分子机制,本课题组长期致力于子宫内膜癌的相关机制研究。前期本课题组发现肝癌衍生生长因子（HDGF）在EC中高表达,为了进一步研究HDGF生物学作用,本课题组采用蛋白免疫共沉淀（CoIP）技术结合质谱法首次验证人锌指E盒结合蛋白（ZEB1）与HDGF确有相互作用,并通过生物信息学预测发现ZEB1可转录调控HDGF表达。由于ZEB1作为调控上皮细胞-间充质转化（EMT）的一个经典转录因子,其与HDGF相互作用的具体机制及二者在子宫内膜癌的功能值得我们深入探究。目的:1.分析与HDGF相互作用的蛋白质谱,选择兴趣蛋白并鉴定;2.探讨HDGF与ZEB1相互作用的分子机制;3.明确HDGF与ZEB1在EC组织的表达特性及相关关系。方法:1.分析与HDGF相互作用的蛋白质谱免疫共沉淀实验检测与HDGF相互作用的蛋白,并用质谱法检测。2.验证HDGF与ZEB1相互作用,并探讨二者的在细胞中的定位（1）内源性相互作用利用HDGF抗体和ZEB1抗体在EC细胞中进行CoIP实验。（2）免疫荧光共聚焦（IF）共定位分析:利用HDGF、ZEB1抗体进行免疫荧光染色。（3）ZEB1在EC中的生物学作用划痕、Transwell、Boyden小室和裸鼠尾静脉注射肿瘤细胞肺转移实验检测细胞的侵袭转移能力。3.ZEB1转录激活HDGF（1）生物信息学发现HDGF启动子区域有ZEB1蛋白的3个潜在结合位点。（2）启动子双荧光素酶报告基因、染色质免疫共沉淀以及凝胶迁移实验检测转录因子ZEB1与HDGF启动子的结合情况;4.免疫组化检测HDGF、ZEB1在EC中的表达情况明确二者在子宫内膜癌组织和癌旁组织中的表达差异;分析二者表达相关性以及与生存期和预后的关系。结果:1.HDGF与ZEB1相互作用;2.ZEB1促进子宫内膜癌的迁移、侵袭与转移;3.ZEB1结合HDGF启动子转录并激活其表达;4.HDGF和ZEB1均在EC组织中高表达且两者的表达呈正相关。结论:本论文从分子机制、细胞功能到临床组织标本逐层验证,研究结果提示ZEB1转录调控HDGF,ZEB1作为经典的转录因子,我们首次发现其可激活HDGF转录表达促进EC的转移,提示二者促进子宫内膜癌的发展具有重要作用。