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炎症反应是机体抵御微生物感染的病理过程,诱发机体内大量促炎因子的产生,激活转录因子NF-κB并诱导其下游炎症相关基因的表达。脂多糖(LPS),作为革兰式阴性杆菌细胞壁的成分,是刺激机体先天免疫的靶点,是建立炎症损伤模型的常用有效试剂。本文以LPS处理建立体外及体内炎症模型,主要研究了炎症对Parkin蛋白表达的影响及Parkin在炎症中的作用,对Parkin的抗炎作用进行初步探究。本实验首先以LPS诱导肿瘤细胞HL-60和MGC-823建立体外肿瘤细胞炎症模型,探究Parkin对转录因子NF-κB的调控。LPS处理会导致细胞活力下降,Bax/Bcl-2比例显著上调以及Caspase-3活化,表明LPS通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。10μM LPS处理细胞会导致细胞内p-IκB表达上调,NF-κB转录活性上调,以及其下游炎性因子TNF-α、IL-6、IL-10的大量表达,都表明LPS处理可以激活NF-κB信号通路。通过小干扰RNA抑制Parkin蛋白的表达,使用双荧光素酶报告基因法检测NF-κB的转录活性,发现沉默Parkin蛋白显著导致了LPS诱导的NF-κB转录活性的上调。而过表达Parkin蛋白显著抑制了NF-κB的活化,并抑制MGC-823细胞的增殖。同时本实验在正常组织来源的HEK 293细胞上以LPS诱导炎症反应,LPS导致该细胞NF-κB活化受损,Parkin蛋白沉默同样上调了NF-κB的活化,但加重了LPS诱导的HEK 293细胞损伤。为探究炎症对Parkin蛋白表达的影响,检测了HEK 293细胞LPS处理之后Parkin蛋白的表达量,发现其表达水平显著下降。采用小鼠腹腔注射LPS(100μg/mouse)建立小鼠体内炎症模型。检测发现LPS注射后的0.5 h、4 h、12 h后小鼠血清内炎性因子TNF-α及NO表达水平相比对照组显著上调,海马脑组织中炎性介质iNOS表达量同样上调。表明LPS腹腔注射诱发小鼠脑内炎症的发生,并且发现LPS诱导的炎症损伤导致海马组织中Parkin蛋白的表达显著下降。以上结果表明,LPS诱导的炎症会导致细胞及组织中Parkin蛋白的表达量显著下降,而Parkin蛋白通过抑制NF-κB的转录活性,降低炎症反应。