CD151在直肠癌组织及尿液exosome小体中表达的对比研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangmanzhuo
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目的:Exosome小体是由多种细胞分泌的携带有细胞遗传物质及蛋白质的小囊泡,在细胞间发挥物质转移及信号传导作用,是近些年人们研究的热点。Exosome小体可能携带某些对免疫功能调控的信息,可促进肿瘤血管的新生和肿瘤转移,以及可以直接作用于肿瘤细胞等途径,影响肿瘤的进展。本课题通过以自身正常粘膜组织做为对照,采用RT﹣PCR法以及Western blot方法检测直肠癌患者癌组织以及正常粘膜组织中CD151m RNA以及CD151蛋白的表达情况,同步采用Western blot方法检测直肠癌患者以及健康志愿者尿液exosome小体中CD151蛋白表达情况,并结合临床病理资料,对比观察两种方法检测CD151基因在直肠癌患者体内表达情况以及其与患者临床病理特征的关系,同时寻求临床无创检测该基因表达情况的有效方法。方法:1本研究分别采用RT﹣PCR法以及Western blot检测法检测40例直肠癌患者癌组织和癌旁粘膜组织(距癌组织边缘≥10cm)中CD151m RNA以及CD151蛋白的表达情况。2采用超速离心法进行分离提取直肠癌患者及健康志愿者尿液中的exosome小体,采用Western blot检测法检测上述40例直肠癌患者以及40例健康志愿者尿液exosome小体中CD151蛋白表达情况。3最后通过对比患者癌组织与尿液exosome小体中CD151蛋白表达水平的差异,并结合临床病理资料,分析其与直肠癌患者临床病理学特征的关系,同时对比两种检测方法的优劣及可靠性。结果:1直肠癌患者癌组织中CD151m RNA以及CD151蛋白的相对表达量显著高于癌旁对照组。应用RT﹣PCR法检测结果显示,在癌旁对照组中CD151m RNA的相对表达量为0.099±0.012,在直肠癌组中CD151m RNA的相对表达量为0.541±0.056。经独立样本t检验分析,CD151m RNA在直肠癌组织中相对表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。应用Western blot检测法检测结果显示,在正常对照组中CD151蛋白相对表达量为0.117±0.007,在直肠癌组中CD151蛋白相对表达量为0.537±0.025。经独立样本t检验分析,CD151蛋白在直肠癌组织中相对表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。直肠癌组织中CD151蛋白以及CD151m RNA的相对表达量与患者病理特征进行相关性分析,应用独立样本t检验分析对数据进行处理,结果显示,CD151m RNA相对表达量以及CD151蛋白的相对表达量与患者直肠癌临床分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05),与患者年龄、性别无关,差异无统计学意义(P>0.05)。2直肠癌患者尿液exosome小体中CD151蛋白水平的相对表达量显著高于正常对照组。应用Western blot检测法检测结果显示,在正常对照组中CD151蛋白相对表达量为0.153±0.015,在直肠癌组中CD151蛋白相对表达量为0.366±0.016。经独立样本t检验分析,CD151蛋白在直肠癌患者尿液中相对表达量明显高于正常对照组(P<0.05)。直肠癌患者尿液中CD151蛋白相对表达量与患者病理特征进行相关性分析,应用独立样本t检验分析对数据进行处理。结果显示,CD151蛋白的相对表达量与患者直肠癌临床分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05),与患者年龄、性别无关,差异无统计学意义(P>0.05)。3对直肠癌组患者癌组织以及尿液exosome小体中CD151蛋白表达率进行卡方检验,在40例直肠癌患者癌组织中的阳性率为87.5%,在尿液exosome小体中的阳性率为82.5%,两组比较?2=0.392,P=0.531,差异没有统计学意义(P>0.05),结果显示CD151蛋白在直肠癌组织中与尿液exosome小体中的表达阳性率无差异,因此,采用Western blot检测法检测尿液exosome小体与癌组织中CD151蛋白表达的情况具有同样的临床指导意义。结论:1 CD151可能参与直肠癌的发生及进展过程,其表达水平与直肠癌病程进展具有密切的关系。直肠癌组织中CD151m RNA的相对表达量以及CD151蛋白的相对表达量与直肠癌临床分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移有关,并且伴随临床分期的进展、浸润深度的增加、淋巴结的转移,CD151的相对表达量明显增加。2采用Western blot法检测尿液exosome小体中CD151蛋白水平的表达情况,与新鲜肿瘤组织检测结果相似,同样可反映CD151蛋白水平的表达差异与临床分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移等病理特征的相互关系。3检测尿液exosome小体中目的基因表达情况的方法,取材方便,结果可靠,并可多次检测,该方法的不断完善和推广,可能为临床恶性肿瘤的治疗和病情监测提供有力的指导依据。
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