目的研究自然衰老小鼠和年轻小鼠中胸腺和脾脏的增龄性改变和脾组织中CD8+CD28+T细胞培养48小时后的差异以及血清微环境对脾组织中CD8+CD28+T细胞的调节作用。为进一步研究血清微环境对于免疫系统的调节作用提供实验依据。方法实验一：C57BL/6N小鼠12-14月龄(老年组)和6-8周龄(年轻组)各五只,测量体重并将胸腺或脾脏取出,称重并与相应体重计算胸腺和脾脏重量指数(组织mg/体重g)。之后用小鼠淋巴细胞分离液分离两组小鼠脾细胞中的淋巴细胞并采用台盼兰排斥实验进行细胞计数。将上述淋巴细胞加入淋巴细胞完全培养基放置于培养箱里培养48小时,之后分别加入PE-anti-mouse CD8、FITC-anti-mouse CD28,24小时内上流式细胞仪检测。数据用SPSS13.0统计软件分析,p<0.05有统计学意义。实验二：小鼠血清购自于中国军事医学科学院；然后用小鼠淋巴细胞分离液分别分离年老和年轻小鼠脾脏中的淋巴细胞。本实验共分为4组：年老鼠淋巴细胞+10%年轻鼠血清(组Ⅰ),年老鼠淋巴细胞+10%年老鼠血清(组Ⅱ),年轻鼠淋巴细胞+10%年轻鼠血清(组Ⅲ),年轻鼠淋巴细胞+10%年老鼠血清(组Ⅳ)。以上各组淋巴细胞分别加入淋巴细胞完全培养基放置于培养箱里培养48小时后,均加入PE-anti-mouse CD8和FITC-anti-mouse CD28,24小时内采用流式细胞仪检测CD8+CD28+T细胞的比例。数据用SPSS 13.0统计软件分析,p<0.05有统计学意义。结果1从年轻到老年,小鼠胸腺的外观由粉红色变为灰白色,质地柔软性变差,而脾脏由鲜红色变成暗红色。老年鼠胸腺重量小于年轻鼠,脾脏重量却大于年轻鼠。老年鼠的胸腺指数和脾脏指数均较年轻鼠低。2老年鼠脾组织中的淋巴细胞数量比年轻鼠多,两者有统计学差异。3脾脏中淋巴细胞培养48小时后,老年鼠的CD8+CD28+T细胞的比例低于年轻鼠的比例。4.年轻血清提高年老鼠T细胞(组Ⅳ)的CD8+CD28+共表达率比年老血清(组Ⅱ)高；但是仍低于年轻鼠T细胞(组Ⅲ)的CD8+CD28+共表达率。而年老血清能使年轻鼠的CD8+CD28+共表达率降低(组Ⅳ比组Ⅲ)。结论(1)小鼠胸腺随年龄增加而萎缩变轻,脾脏重量却随年龄增大而增加,并且脾脏组织中的淋巴细胞数量增多,这可能和老年个体中体液免疫增强有关。从脾脏中提取的淋巴细胞培养48小时后,老年组CD8+CD28+T细胞数量低于年轻组。CD8+CD28+T细胞是一种可靠的衰老指标。(2)年轻血清可以使衰老的T细胞变得“年轻态”,反之,年老血清也可以使年轻的T细胞变得“老龄化”。