异氟醚诱导大鼠中枢神经系统C-fos基因的表达——异氟醚作用位点的初步研究

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目的 观察异氟醚麻醉后大鼠中枢神经系统c-fos基因的表达,了解异氟醚在中枢神经系统的作用部位,探讨吸入全麻机理。方法 SD大鼠40只,雌雄不拘,体重178.6±18.0g,同龄80±15天,随机分为对照组、0.6%异氟醚组、1.2%异氟醚组和1.8%异氟醚组,每组10只。实验组分别吸入0.6%、1.2%和1.8%的异氟醚1h,对照组除不吸入异氟醚外,其余条件完全同实验组。停止吸入后,大鼠被腹腔注射3%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉后开胸,经升主动脉灌注生理盐水100ml洗去全身血液,继之灌注多聚甲醛液(0.1mmol/L,pH7.4,含4%的多聚甲醛)250ml,固定90分钟后,取全脑和脊髓L4-6节段石蜡包埋,切片(片厚5um),应用c-fos基因免疫组织化学方法,低倍显微镜(×10)下观察染色阳性细胞的分布情况,高倍镜(×20)下观察鉴别Fos染色阳性细胞并作阳性细胞记数。结果 对照组中未发现Fos阳性细胞,实验组大鼠的皮质、丘脑、中脑、桥脑、延髓、小脑可观察到Fos阳性神经细胞,与对照组相比P<0.05和P<0.01,这些神经细胞的分布局限于某些区域;同时发现Fos阳性神经细胞随吸入异氟醚浓度的增加而增多,实验组间相比P<0.05和P<0.01。0.6%的异氟醚组脊髓内未发现Fos阳性神经细胞,1.2%异氟醚组脊髓中可见Fos阳性神经细胞,与对照组相比P<0.01,1.8%的异氟醚组脊髓中可见Fos阳性神经细胞增多,甚至脊髓的前角可观察到Fos阳性神经细胞,与对照组相比P<0.01,与1.2%异氟醚组相比P<0.01。结论异氟醚能诱导大鼠皮质、丘脑、中脑、桥脑、延髓、小脑和脊髓c一fos基因的表达;皮质、丘脑、中脑、桥脑、延髓、小脑和脊髓是异氟醚的作用位点;0.6%的异氟醚的麻醉作用以脊髓上中枢主。
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